Возбудитель гемофилёзной плевропневмонии свиней

ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия»

Факультет ветеринарной медицины

 

Кафедра микробиологии, вирусологии и фармакологии

 

 

 

 

 

 

КУРСОВАЯ РАБОТА

 

По теме: «Возбудитель гемофилёзной плевропневмонии свиней»

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Выполнила студентка

3 курса ВВ-322

Мудрая Светлана

Алексанлровна  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

                                                 Киров 2011

                                            Содержание

 

     Введение……………………………………………………………………….3

     1. Историческая справка изучения болезни и возбудителя заболевания…4

      2. Систематическое положение возбудителя ………………………………5

     3. Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя…….…….6

4. Культуральные свойства……………………………………………………7

5. Биохимические свойства…………………………………………………..9

6. Патогенные свойства……………...………………………………………10

7. Устойчивость к фактором внешней среды………………………………11

8. Антигенная структура…………………………….………………………12

9. Бактериологическая диагностика………………..………………………13

10. Специфическая профилактика заболевания……………….…………..17

     Заключение …………………………………………………………………..18

    Список используемой литературы………………………………………….19

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Введение

 

Болезни свиней представляют одну из значимых проблем ветеринарной науки и практики. Перевод свиноводства на промышленную технологию выявил значение ряда инфекционных болезней, которые до этого оставались за пределами внимания специалистов.

Актинобациллёзная (гемофилёзную) плевропневмония приобрела повсеместное распространение, наносит значительный экономический ущерб, с большим трудом поддаётся лечению и специфической профилактике.

Гемофилёзная плевропневмония  свиней- инфекционная контагиозная болезнь, характеризующаяся при остром течении  геморрагическим воспалением лёгких и фибринозным плевритом, а при подостро и хроническом –развитием очаговой гнойной некротизирующей плевропневмонией и фибринозным плевритом.

Эпизоотологические  данные. Источник инфекции больные или переболевшие гемофилезным полисерозитом поросят, а также свиноматок – носители гемофильных бактерий. Болезнь возникает на фоне ослабления резистентности организма, обусловленного различными неблагоприятными (ранний отъем поросят, перегруппировка, транспортировка, переохлаждение или перегревание и др.) факторами. В промышленных комплексах поросята заболевают преимущественно на 15-20 день после отъема, хотя возможны случаи заболевания поросят сосунов до 26-дневного возраста. Заражаются они аэрогенно. Болеют поросята в течение года, но наиболее массово болезнь проявляется в холодное время. Заболеваемость достигает до 25%, а смертность составляет 10-15% восприимчивого поголовья.  
 Течение и симптомы. Болезнь протекает в острой, подострой и хронической формах. Температура тела повышается до 40,5-41,5 °С. Поросята отказываются от корма, шерсть взъерошена, передвигаются они осторожно. Для облегчения работы сердца и легких часто принимают позу сидячей собаки. Иногда наблюдается кашель, чихание, рвота и симптомы поражения центральной системы и артриты.  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1. Историческая справка изучения болезни и возбудителя заболевания.

 

Впервые о плевропневмонии  свиней сообщили в 1961 году П. Метьюз и  И. Патиссон, а затее в 1963 году- Н. Олендер. Но подробно описали болезнь  в 1964 году Р. Шоуп и в 1968 году – И. Николь. В последующие годы болезнь зарегистрировали в Дании, Англии, Голландии, Финляндии, Канаде , Австралии, Бельгии и в других странах. Вирулентные культуры H/ Pleuropneumoniae выделены из лёгких больных пневонией свиней и в СССР (Д.И. Скородумов, М.А. Сидоров,1980). По нению И. Николь (1968), Р. Нильсен (1976) и других исследователей, гемофилёзная плевропневмония возникла на фоне специфических условий развивающегося промышленного свиноводства.

В России исследования по указанным вопросам были начаты в 1974г. ВНИИЭВ имени Я. Р. Коваленко под руководством профессора Сидорова .А. Имевшиеся к этому периоду публикации в отечественной литературе по биологии гемофилёзных бактерий, патогенных для свиней, были недостаточны для эффективной лабораторной диагностики инфекций, вызываемых  Actinobacillus ( Haemophilus) A. Pleuropneumoniae. Разработки по диагностике и специфической профилактике перечисленных болезней практически отсутствовали.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Систематическое положение возбудителя.

 

     Царство Procariotae

Отдел Gracilicutes

Семейство Pasteurellaceae

Род Haemophilus

Вид Haemophilus pleuropneumoniae

Подвид 

- H. pleuropneumoniae

-H. Influenzae

-H. aegiptius

-H. haemoglobinophilus

-H. ducreyi

-H. parainfluenza

-H. parahaemolyticus

-H. paraphrohaemolyticus

-H. paraeuniculum

-H. aphrophilus

-H. segnis

-H. parasuis

-H. paragallinarum

-H. haemolyticus

-H. avium

-H. somnus

-H. Agni

-H. equigenitalis

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

3. Морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов.

 

Возбудитель гемофилёзной плевропневмонии 

Возбудитель – гемофилёзные бактерии – Haemophilus pleuropneumoniae ( H. Parahaemolyticus). Это мелкие ( 0,3-0,4-0,5 мкм) грамотрицательные, неподвижные коккобактерии и палочки. Спор не образуют; вирулентные штаммы имеют капсулу.

Возбудитель проявляет  широкий диапозон морфологической изменчивости, что необходимо учитывать при его идентификации. Наиболее стабильная и типичная морфология бактериальных клеток в виде мелких палочек и коккобактерий наблюдается при культивировании на шоколадном агаре и сывороточно-дрожжевом агаре.большой полиморфизм характерен для молодых 4-6 часовых культур: в них часто находят нитевидные формы бактерий.

В жидких питательных  средах бактериальные клетки 16-18часовых  культур имеют более однородню  морфологию и обычно представлены мелкими  биполярными палочками и коккобактериами. Биполярную окраску следует считать типичным признаком для бактериальных клеток 12-18часовых агаровых и бульонных культур. Капсула возбудителя сравнительно легко обнаруживаеться у вирулентных штуммов, при окраске по методу Гинса. Свежевыделенные культуры при культивировании на шоколадном агаре часто образуют слизеподобное вещество, и при суспензировании бактериальной массы в физиологическом растворе культура тянеться за петлёй в виде слизистых нитей.

В поражённой легочной ткани возбудитель представлен в виде грамотрицательных биполярных палочек, коккобактерий, расположенных одиночно или парами.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

4.  Культуральные свойства.

 

Возбудитель гемофилёзной плевропневмонии.

Возбудитель растёт при свободном доступе  кислорода и особенно интенсивно

размножается в условиях аэрирования жидкой культуры. Хороший рост наблюдался также без кислорода в глубине высокого столбика полужидкого агара, в среде Кит-Тароцци.

Температурный оптимум роста составляет 37-38 С, хотя замедленный рост отмечается и при более низких температурах(25-30 С). Рост Н. pleuropneumoniae может наблюдаться на средах с диапазоном рН 6,2-8.

Возбудитель плевропневмонии свиней - Н. pleuropneumoniae относится к ДПНзависимым видам (дифосфопиридиннуклеотид) видам гемофильных бактерий. В процессе культивирования референтных штаммов неоднократно отмечалось снижение их потребности в ДПН вплоть до полного исчезновения зависимости от данного фактора роста. При этом у культур нередко изменялись биохимическая активность и вирулентность.

Оптимальными питательными средами для культивирования микроорганизма являются сывороточно-дрожжевой МПА, шоколадный МПА, сывороточнодрожжевой МПБ и агар Левинталя.

На сывороточно-дрожжевом агаре и агаре Левинталя макроскопически различимые колонии возбудителя обнаруживают уже через 4-6 часов культивирования. Позднее можно различить 2 вида колоний: крупные М-форма1,5-2мм в диаметре и мелкие S-форма-0,3-0,6 мм. Как крупные таки мелкие колонии имеют правильную круглую форму, ровные края, слабовыпуклую гладкую поверхность, серо-белый цвет, слизистую консистенцию, бактериальная масса хорошо суспензируется в 0,85°/о-ном растворе NaC1. Характерным признаком М- и S-колоний б-18-часовых культур является флуоресценция в косопроходящем свете. Флуоресцирующие колонии имеют яркий медно-красный цвет с зелёным отливом, мелкозернистую структуру, иногда лёгкую концентрическую исчерченность. Нефлуоресцирующие колонии имеют слабую красновато-серую или зеленоватую окраску.

На шоколадном агаре, приготовленном с добавлением к МПА крови барана или лошади, культуры возбудителя растут хорошо. Различают колонии 2 типов: крупные(1-1,8мм) и мелкие(0,2-0,5мм). Они имеют серо-белый цвет, правильную округлую форму, выпуклую гладкую поверхность, слизистую консистенцию.

На кровяном агаре (5°/о крови кролика, лошади или барана) с бактерией-1

кормилкой ДПН-зависимые культуры возбудителя вырастают через 18-24 ч культивирования в виде мелких сателлитных колоний в зоне 1,5-3 см от штриха баккормилки.. колонии обычно окружены светлой зоной гемолиза (бета-гемолиз). Саттелитные колонии имеют серо-белый цвет, округлую форму, ровные края и гладкую выпуклую поверхность. Культуры ДПН-независимого биоварианта варастают на кровяном МПА в виде серо-белых полупрозрачных колоний, правильной круглой формы, диаметром 1-1,5 мм, окруженных зоной бетагемолиза.

На сывороточно-дожжевом МПА с5°/о крови барана возбудитель  формирует круглые серо-белые  колонии диаметром 1-2 мм, окруженные четко выраженной прозрачной зоной  гемолиза.

При посеве на жидкие питательные среды (М11Ь, бульон Хоттингера) диссоциировавшие культуры могут вызывать равномерное помутнение бульона, а нормальные бактерии образуют крупицки, которые со временем оседают на дно пробирки. Иногда среда остаётся прозрачной, в ней взвешены мелкие крупинки, которые со временем оседают на дно пробирки, образуя массивный осадок.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5.  Биохимические свойства.

 

Возбудитель гемофилёзной плевропневмонии

сахаролитические и  протеолитические свойства выражены слабо;  
гемолиз не дают.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

6.  Патогенные свойства.

 

До настоящего времени  надёжная лабораторная модель для воспроизведения  гемофилёзной плевропневмонии не подобрана.

Определяли  патогенность референтных и эпиозотическик штаммов Н.

pleuropneumoniae для отдельных видов лабораторных животных при различны к

способах введения культуры. Белые мыши оказались чувствительны к большинству культур возбудителя при внутрибрюшинном, интраназальном и подкожном способах заражения.

Наибольшую чувсвительность белые мыши проявляют к внутрибрюшинному заражению. При дозе 0,5 млрд. микробных клеток в зависимости от штамма погибало 70-100°/о животных в течение 5 суток. На вскрытии у павших животных находили в легких очаги геморрагического воспаления.

Заражение морских свинок показало, что нечувствительны интраназальному способу введения бактерий; при этом в зависимости от штаммовой принадлежности культуры погибало от 25 до 100°/о животных. Смерть морских свинок наступала на 1-4 сутки после заражения с выраженными клиническими симптомами поражения органов дыхания. На вскрытии у павших животных регистрировали геморрагическую или фибринозно-геморрагическую пневмонию.

В опытах на кроликах установлено, что внутрибрушинное и интраназальное

введение культур Н. pleuropneumoniae приводит к гибели отдельных животных.

При антроназальном введении у заболевших кроликов также развивается характерная геморрагическая или фибринозно-геморрагическая пневмония.

В опытах сравнительного изучения патогенности референтных  и эпизоотических штаммов возбудителя на свиньях было установлено, что культуры всех штаммов независимо от серовариантной принадлежности вызывают при антроназальном и трахеальном введении однотипные клинические признаки и паталогоанотомические изменения. В течение 10 суток погибают 50-80% зараженных животных.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

7. Устойчивость к действию факторов внешней среды.

 

Вне организма в условиях темноты в высохшем субстрате  не теряет своей активности до 5 сут.; в воде на бетоне, дереве зимой сохраняет жизнеспособность до 93 сут.в остальные сезоны года до 50 сут.В замороженной свинине выживает 6 мес. в охлажденной - более 15 дней.Быстро погибает при 70 градусах и выше.Дезинфицирующие препараты в общепринятых дозах(растворы формальдегида,хлорсодержащие препараты,а также их аэрозоли) надежно обезвреживают объекты внешней среды от возбудителя(1я группа по устойчивости).  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

8. Антигенная структура.

 

Штаммы возбудителя обладают различными антигенами, на основании чего их подразделяют на различные сероварианты. Число серовариантов возбудителя, отличающихся по поверхностным антигенам, было расширено до пятит(1,2,3,4,5), причём серовариант 5 подразделяется на 2 подтипа. Согласно результатам исследований С.Розендаль и Д.Бойд (1982), культуры Н. pleuropneumoniae включают семь серовариантов (шестой серовариант штамм Femo, седьмой —штамм WF 83), а позднее был идентифицирован дополнительно восьмой серовариант.

В перекрёстной реакции агглютинации установлено, что поверхностные антигены, отвечающие за типовую (серовариантную) специфичность штаммов возбудителя, могут быть как термостабильными, так и термолабильными. Типоспецифические термолабильные антигены локализуются в капсуле. Предполагается, что общие видовые антигены локализуются в клеточной стенке бактерий. Термостабильный типоспецифичный антиген тоже расположен в капсуле, а потеря его активности при прогревании обусловлена отмыванием бактериальных клеток после автоклавирования.