Сибирская язва

Биологическая проба. Бактериоскопия. Из патологического материала для микроскопии готовят мазки, часть красят по Граму и обязательно на капсулы по Михчну, Ребигеру, Ольту и др. Важным диагно-стическим признаком является обнаружение типичных по морфо-логии капсульных палочек.

Посев на питательные среды. Исходный мате-риал засевают в МПБ  и на МПА (рН 7,2--7,6), инкубируют посевы при температуре 37 °С в течение 18--24 ч, при отсутствии роста их выдерживают  в термостате еще 2 сут. Культуры просматривают, определяют их типичность, готовят  препараты, микроскопируют. В мазках из культур обнаруживают бескапсульные  палочки и споры. Биологическая проба oсуществляется на белых мышах, морских свинках, кроликах, одновременно с посевом материала на питательные среды. Белых мышей заражают подкожно в заднюю часть спины (по 0,1--0,2 мл), морских свинок и кроликов - под кожу в область живота (по 0,5--1,0 мл). Мыши погибают через 1--2 сут, морские свинки и кролики -- через 2---4 сут. Павших животных вскрывают, делают мазки и посевы из крови сердца, селезенки, печени и инфильтрата на месте инъекции исследуемого материала. Для oкраски сибиреязвенных спор используют методы: Ауески, Златогорова, Дорнера, Пешкова, Мюллера, Трухильо, Клейна, Шеффера, Фултона и др. Лучше окрашиваются споры методом Ауески и особенно Трухильо. [12]

Идентификация возбудителя сибирской язвы. Применительно к возбудителю сибирской язвы имеется большая группа микробов-сапрофитов, близкородственных Bac.anthracis по основным культурально-морфологическим и биохимическим свойствам (Bac. anthracoides, Bac.pseudoanthracis, Bac. cereus, Bac. mesentericus, Bac.megaterium, Bac. subtilis, Bac. mycoides).

Идентификацию проводят по следующим признакам: морфология микроба, включая наличие капсул в мазках из исходного патологического материала или органов павших подопытных животных (сапрофиты капсул не имеют); культуральные свойства; патогенность для лабораторных животных (гибель хотя бы одного из двух лабораторных животных, зараженных суспензией из исходного патологического материала или полученной культурой возбудителя, с последующим выделением ее из органов мыши или морской свинки. Сапрофиты непатогенны для морских свинок и кроликов)[4].

При наличии в мазках характерных морфологических и культуральных свойств и капсул из исходного патологического материала дальнейшее изучение культуры не проводят. В случае получения нечетких результатов по одному из первых двух свойств, не дожидаясь результатов биопробы, определяют чувствительность культуры к сибиреязвенным бактериофагам и пенициллину.

Проба бактериофагом (лизабельность фагом). Сибиреязвенный фаг, взаимодействуя с гомологичной культурой, вызывает ее лизис. Эта реакция высокоспецифична, и ее применяют для идентификации бациллы антракса, а также диф-ференциации ее от ложносибиреязвенных бацилл. В качестве индикаторных у нас в стране выпускают два штамма фагов: «К» ВИЭВ и «Гамма» МВА. Разработаны пробирочный метод, микро-метод и реакция нарастания титра фага.[15]

Тест „жемчугового ожерелья" основан на подавлении пенициллином синтеза клеточ-ной стенки бациллы антракса и образовании сферопластов. Испы-туемую трехчасовую бульонную культуру высевают на МПА в чашки Петри: в первой чашке содержится 0,5, во второй -- 0,05 ЕД пенициллина на 1 мл среды, третья -- контрольная. Посевы инкубируют 3 ч при температуре 37 ⁰С. На агаре с пенициллином бацилла антракса растет в виде цепочек, состоящих из шарообраз-ных форм, напоминающих ожерелье из жемчуга. Сибирсязвснноподобные сапрофиты на агаре с пенициллином этого феномена не дают.[5]

Иммунофлюоресцентный  тест. Идентификация возбудителя сибирской язвы при помощи флюоресцирующих антител - ориентировочный метод и требует дополнительного изучения вирулентности, капсулообразования, фагочувствительности. Подвижность устанавливается микроскопически или путем посева культуры уколом в столбик 0,3 %-ного агара. Неподвижные культуры растут только по ходу укола, подвижные - дают диффузный рост. Возбудитель сибирской язвы неподвижен, многие спорообразующие аэробные сапрофиты подвижны.[4]

Гемолитическая активность не может быть надежным критерием  дифференциации бациллы антракса, как  правило, эта бактерия не гемолизирует эритроциты барана или же лизирует их очень медленно, но этот признак  у разных штаммов вариабелен. Лецитиназная активность у возбудителя сибирской язвы низкая: этот микроб или очень медленно свертывает, или вообще не свертывает желток куриного яйца. B.cereus интенсивно синтезирует лецитиназу и вызывает свертывание желтка через 6-10 ч. Не образует бацилла антракса и фосфатазу, в то время как сапрофитные споровые аэробы ее продуцируют.

Постановка диагноза. Диагноз на сибирскую язву у животного считают установленным в одном из следующих случаев:

- обнаружение капсульных форм Bac. anthracis в патологическом материале;

- гибель хотя бы одного лабораторного животного из двух, зараженных суспезией из исходного патологического материала, с последующим выделением из его органов культуры Bac. anthracis даже при отсутствии роста культуры возбудителя из патологического материала;

- получение положительной реакции преципитации при исследовании загнившего исходного патологического материала;

- получение положительной реакции преципитации при наличии характерной клинической картины и патологических изменений у свиней даже при отсутствии культуры возбудителя в высевах из исходного патологического материала и отрицательном результате биопробы.[2]

Методы ускоренной диагностики. Кроме пробы бактериофагам, реакции "жемчужное ожерелье", в лабораторной практике используют и другие методы ускоренной диагностики антракса: экстренная диагностика реакцией пассивной гемагглютинации (РПГА), метод быстрого выявления капсулы на среде ГКИ (in vitro), метод выявления капсулы in vivo, метод выявления капсулообразования на селективной среде, метод ускоренной диагностики на сывороточной питательноцй среде в атмосфере углекислого газа, люминесцентно-серологический метод, люминесцентно-серологический метод с использованием капсульных сибиреязвенных сывороток, метод ускоренной диагностики с применением флюорисцирующих антител. В последние годы разработаны молекулярно-биологические методы обнаружения генома бациллы сибирской язвы (полимеразная цепная реакция).

Дифференциальный диагноз. Из-за многообразия форм проявления у животных данная болезнь имеет ряд сходных клинических признаков со многоими болезнями инфекционной и неинфекционной этиологии. При постановке диагноза необходимо исключить пастереллез, злокачественный отек, эмфизематозный карбункул, брадзот и энтеротоксимию овец, чуму свиней, африканскую чуму, инфекциооную анемию и грипп лошадей, пироплазмозы, фарингиты незаразной этиологии, долезни сердца и желудочно-кишечного тракта (острая тимпания рубца, колики у лошадей).[8,11]

6. ИММУНИТЕТ И СРЕДСТВА ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ

Мероприятия по профилактике заболеваний животных и людей  сибирской язвой. В стационарно неблагополучных по сибирской язве пунктах и на угрожаемых территориях территориальный центр госсанэпиднадзора и станция по борьбе с болезнями животных проводят:

- регистрацию эпизоотических  очагов в специальном журнале,  который постоянно хранится в  делах районной (городской) ветеринарной  станции и в центре санитарно  - эпидемиологического надзора; вместе  с журналом обязательно хранят  выкопировки с карт территории  стационарно неблагополучных пунктов  с обозначением на них места  и границ почвенных очагов  сибирской язвы;

указанные места должны быть ограничены канавами (по всему периметру), обнесены изгородью, исключающей случайный  доступ людей и животных, и обозначены табличками с надписью "сибирская  язва";

- контролируют проведение  работ по ограждению и содержанию  в надлежащем санитарном состоянии  скотомогильников, отдельных старых  захоронений животных и биотермических  ям, обеззараживанию почвы в местах  с достоверно установленными  границами захоронений трупов  животных, павших от сибирской  язвы;

- организуют постоянный  надзор за санитарным состоянием  мест скопления скота (базары, выставки, выводки и др.), заготовки,  хранения и переработки сырья  и продуктов животного происхождения.

В стационарно неблагополучных  по сибирской язве пунктах и на угрожаемых территориях:

- не допускается вынужденный  убой скота без разрешения  ветеринарного врача; в случае  вынужденного убоя запрещается  реализация мяса и других продуктов  в пищу людям и для кормления  животных без лабораторного исследования;

- требуется обязательное  согласование с ветеринарной  и санитарно - эпидемиологической  службами проведения агромелиоративных,  строительных и других работ,  связанных с выемкой и перемещением грунта; В санитарно - защитной зоне почвенных очагов сибирской язвы не разрешается отвод земельных участков для проведения изыскательских, гидромелиоративных, строительных и других работ, связанных с выемкой и перемещением грунта, последующим затоплением, подтоплением или изменением уровня грунтовых вод, а также передача в аренду, продажа в личную собственность, выделение под сады, огороды или иное землепользование участков территории в непосредственной близости к почвенным очагам сибирской язвы; размеры санитарно - защитной зоны устанавливают органы ветеринарной службы и санитарно - эпидемиологического надзора с учетом особенностей местности и вида предполагаемых работ;

- регулярно проводится  разъяснительная работа среди  населения, владельцев скота и  работников животноводства об  опасности и сущности заболевания  сибирской язвой.

На угрожаемых по сибирской  язве территориях, определяемых ветеринарными  органами республик, краев, округов  и областей по согласованию с Департаментом  ветеринарии Минсельхозпрода РФ, проводят плановую профилактическую иммунизацию  всех восприимчивых к болезни  сельскохозяйственных животных, независимо от их принадлежности, используя принятые в практику вакцины в порядке  и в сроки, предусмотренные наставлениями  по их применению.

О проведении прививок против сибирской язвы составляют акт с  указанием количества привитых животных (по видам), наименования использованной вакцины, предприятия - изготовителя, номера серии и контроля, даты изготовления и количества израсходованной вакцины. К акту прилагают опись вакцинированных  животных, принадлежащих населению, с указанием фамилий владельцев. Если по какой-либо причине животное нельзя вакцинировать, его включают в отдельную опись с указанием  причины, из-за которой не проведена  вакцинация, и возможного срока прививки, о чем ставят в известность  владельца животного. Акты и описи  подлежат хранению в учреждениях  государственной ветеринарной сети в течение двух лет.

Убой привитых против сибирской  язвы животных на мясо разрешается  не ранее чем через 10 суток после  прививки. В вынужденных случаях  по разрешению ветеринарного врача  убой привитого скота может быть проведен ранее указанного срока - при  отсутствии поствакцинальных осложнений и соблюдении требований, указанных  в действующих "Правилах ветеринарного  осмотра убойных животных и ветеринарно - санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов", а также в "Ветеринарно - санитарных правилах внутрихозяйственного убоя скота на мясо". Шкуры, снятые с вынужденно убитых животных, хранят в изолированных условиях до получения  результатов исследования проб кожи в реакции преципитации.

Снятие шкур с животных, павших в период до истечения 10 суток  после прививки противосибиреязвенной  вакцины, не допускается. Решение о проведении и объеме профилактической иммунизации людей против сибирской язвы принимается территориальными центрами госсанэпиднадзора при согласовании с местными органами здравоохранения с учетом эпизоотологических и эпидемиологических показаний. Прививкам подлежат лица, по роду деятельности подвергающиеся риску заражения в процессе манипуляций с материалами, подозрительными на обсемененность возбудителем, или при работе с культурами возбудителя сибирской язвы.

Иммунизация осуществляется в соответствии с инструктивно - методическими документами Госкомсанэпиднадзора РФ и Минздравмедпрома РФ.

В соответствии с Законом  РФ "О ветеринарии" владельцы  животных обязаны:

- соблюдать установленные  ветеринарные и санитарные правила;

- по требованию ветеринарных  специалистов представлять животных  для профилактической вакцинации;

- сообщать местным органам  государственной ветеринарной службы  о вновь приобретенных животных;

- немедленно сообщать  ветеринарным специалистам о  случаях заболевания, вынужденного  убоя или гибели животных.

Руководители и владельцы  предприятий по заготовке, переработке  и реализации животноводческой продукции  и сырья обязаны:

- иметь разрешение органов  государственного ветеринарного  и санитарно - эпидемиологического  надзора на производственную  деятельность и выполнять установленные  ветеринарные и санитарные правила;

- обеспечивать необходимые  условия для проведения ветеринарными  специалистами осмотра и ветеринарно-санитарной экспертизы туш и внутренних органов животных, лабораторных исследований, обеззараживания мяса и других продуктов, а также утилизации или уничтожения продуктов, признанных негодными в пищу;

- обеспечивать правильное  хранение мясной продукции, а  также сохранность подозрительного  на сибирскую язву мяса в  период проведения лабораторных  исследований в специальных изолированных  камерах, холодильниках;

- проводить обучение сотрудников  правилам профилактики профессиональных  заболеваний сибирской язвой.[13]

Мероприятия при заболевании  людей сибирской язвой. Медицинский работник, выявивший больного или подозрительного на заболевание сибирской язвой человека, обязан оказать ему первую помощь и в течение 24 часов направить экстренное извещение в районный центр госсанэпиднадзора.

О случаях заболевания  человека сибирской язвой районный центр госсанэпиднадзора сообщает:

- вышестоящему по подчиненности  учреждению госсанэпиднадзора;

- главному государственному  ветеринарному инспектору района (города);

- главе администрации  по территориальной принадлежности;

- Госкомитету санэпиднадзора  Российской Федерации (в виде  внеочередного донесения о групповых  заболеваниях с числом случаев  5 и более).