Шпаргалка по "Цитологии"

 

 

 

 

 

 

Билет №9

1. Методы исследования  живой клетки:

а) метод световой микроскопии (один из основных методов), 

б) метод клеточных культур (для изучения клеток органов и тканей животных),

 в) методы микрохирургии (для исследования живых клеток),

г) метод флуоресцентной микроскопии,

д) конфокальный сканирующий световой микроскоп (для получения 3D изображения клетки).

е) темнопольная оптическая микроскопия

ж) фазово-контрастная микроскопия

Метод клеточных культур: в камеру, наполненную питательной средой помещают небольшой кусочек живой ткани. Спустя некоторое время на периферии этого кусочка начинается деление и ост клеток. В другом случае этот кусочек обрабатывают раствором фермента трипсина что приводит к полному разделению клеток друг от друга. Затем все отмытые клетки помещают в сосуд с питательной средой, где они начинают размножаться, образуя сначала колонии, а затем сплошной клеточный пласт. В культуре можно выращивать и растительные клетки. Для этого берут кусочки ткани обрабатывают ферментами, которые растворяют клеточные оболочки, отделившиеся клеточные тела помещают в культурную среду, где они делятся и образуют зоны размножившихся клеток.

Метод микрохирургии: с помощью прибора микроманипулятора клетки разрезаю, извлекают из них части, вводят вещества. При помощи этого метода можно поворачивать  в клетках митотические веретена, оттаскивать отдельные хромосомы, вводить в живую клетку меченые антитела.

При изучении живых клеток их пытаются окрашивать с помощью витальных красителей. Это красители кислой (трипановый синий) и основной(метиленовый синий) природы, при окрашивании краситель собирается в цитоплазме в виде гранул.

Метод флуоресцентной микроскопии: суть его заключается в том, что целый ряд веществ обладает способностью светиться при поглощении ими световой микроскопии. Можно применять этот метод, добавляя живым клеткам флуорохромы. Например, акридиновый оранжевый связывается с нуклеиновыми кислотами. После окрашивания акридиновым оранжевым видно, что ядра имеют зеленое свечение, а цитоплазма и ядрышки - красные.

 

2:строение и  типы митотических хромосом

.Хромосомы  - это структуры  клеточного ядра, носители генов; способны к воспроизведению, обладают  структурной и функциональной  индивидуальностью; состоят из вещества, называемого хроматином, т.е. молекулы  ДНК, связанной с белками.

Хромосома – структура НК, функция которой состоит в хранении, реализации и передаче наследственной информации;

Хромосомы эукариот – это ДНК – содержащие структуры в ядре, митохондриях, пластидах;

Хромосомы прокариот – это ДНК – содержащие структуры в клетках без ядра;

Хромосомы вируса – молекулы ДНК (РНК) в составе капсида;

Вироиды – это только молекулы РНК.

1 — хроматида;

2 —центромера;

3 — короткое плечо;

4 — длинное плечо.

Центромера – это участок хромосомы, характеризующийся специфической последовательностью нуклеотидов и структурой. В хроматине центромеры нормальный гистон H3 замещен центромер-специфическим гистоном CENP-A.

Кинетохор расположен в области центромеры. Это пластинчатая белковая структура, имеющая форму диска. К нему подходят пучки микротрубочек митотического веретена, идущие в направлении к центриолям.

Метацентрические хромосомы - Хромосомы с равными или почти равными плечами. (ЦИ=46-50)

Субметацентрические хромосомы – хромосомы с плечами неодинаковой длины (ЦИ=26-45).

Акроцентрические хромосомы – одно плечо значительно, в несколько раз короче другого (ЦИ=3-25)

Схема морфологии

метацентрических (а), субметацентрических (б), акроцентрических (телоцентрических) (в) и спутничных (ядрышковых) (г) хромосом

Т — теломеры;

Ц — центромеры (первичные перетяжки);

ЯОР — ядрышковый организатор (вторичная перетяжка).

3:Гиалиновый хрящ: строение и возрастные особенности

Гиалиновый хрящ, из которого построены суставные, реберные, эпифизарные хрящи и ряд хрящей гортани; гладкий, блестящий, голубовато-белого цвета 

Гиалиновых хрящ является самым распространенным в организме животных и человека. Он образует хрящевую часть ребер, хрящи гортани трахеи и бронхов, а также покрывает суставные поверхности костей.

Снаружи гиалиновый хрящ покрыт надхрящницей. Она образована плотной оформленной мембранозной соединительной тканью. В ней выделяют два слоя: наружный волокнистый и внутренний клеточный в котором располагаются хондробласты.

Под надхрящницей лежит гиалиновая хрящевая ткань. Гиалиновый хрящ назван так из-за схожести по цвету со стеклом.

В гиалиновом хряще выделяют несколько зон:

1.Непосредственно под  надхрящницей узкой полоской  лежит недифференцированная хрящевая  ткань. Её называют также зоной  молодых хондроцитов. Непосредственно под надхрящницей хондроциты имеют веретеновидную форму.

Глубже форма хондроцитов становится овальной, а затем округлой. Молодые хондроциты способны вырабатывать коллаген, поэтому пространство между ними достаточно большое, а способность вырабатывать протеогликаны у них небольшая.

2.Зона зрелой хрящевой  ткани (Зона изогенных групп)

Она составляет основную массу хрящевой ткани. Изогенная группа лежит в одной лакуне, но каждый хондроцит покрыт отдельной капсулой. Это зрелые хондроциты. У них хорошо выражена способность вырабатывать гликозаминогликаны, которые диффундируют в окружающее межклеточное вещество. Вместе с белками гликозаминогликаны образуют протеогликаны образуют протеогликаны, которые связывают воду. Поэтому зона зрелой хрящевой ткани обладает хорошей гидративностью. Возле изогенной группы имеется высокая концентрация хондроэтинсерной кислоты. Этот участок называется территориальным матриксом, который занимает изогенная группа. По мере удаления от изогенной группы концентрация хондроэтин серной кислоты уменьшается, и межклеточное вещество становится оксифильным.

В крупных хрящах по мере удаления от надхрящницы вглубь хряща питание хрящевых клеток становится хуже и начинается их дистрофия. Они теряют способность вырабатывать гликозаминогликаны, но продолжают вырабатывать основной белок протеогликанов. В результате межклеточное вещество заполняет белковая масса – альбумид. Но поскольку гликозаминогликанов нет, то в этом месте соли выпадают в осадок. Этот процесс называется омелением. Омелевший хрящ становиться хрупким, в него врастают кровеносные сосуды и в результате он превращается в костную ткань.

На суставной поверхности кости, гиалиновый хрящ не имеет надхрящницы.

В нем различают три зоны:

1. Поверхностная, где хрящевые клетки имеют уплощенную форму, и здесь хондроциты располагаются на поверхности

2. Промежуточная зона. Здесь  хрящевые клетки становятся овальными  и образуют колонну.

3. Глубокая зона. Контактирует  с костной тканью. Её образуют  пузырчатые хондроциты.

Хрящ суставной поверхности питается из синовиальной жидкости, которые находятся в суставе. Поэтому те участки хряща, которые находятся близко к кости дистрофируются.

Возрастные изменения хряща выражаются в накоплении известковых солей и происходит, как говорят, обызвествление. Старый хрящ становится хрупким и ломким. Обызвествлению обычно подвергаются хрящи дыхательного горла и гортани. Этот процесс начинается с глубоких слоев стареющего хряща, удаленных от источника питания – надхрящницы.

 

 

 

 

 

 

 

 

Билет №10

1. Микротрубочки. Центры.

1.Микротрубочки — белковые  внутриклеточные структуры, входящие  в состав цитоскелета.

Микротрубочки представляют собой полые внутри цилиндры диаметром 25 нм. Длина их может быть от нескольких микрометров до, вероятно, нескольких миллиметров в аксонахнервных клеток. Их стенка образована димерами тубулина. Микротрубочки, подобно актиновым микрофиламентам, полярны: на одном конце происходит самосборка микротрубочки, на другом — разборка. В клетках микротрубочки играют роль структурных компонентов и участвуют во многих клеточных процессах, включая митоз, цитокинез и везикулярный транспорт.

Микротрубочки — это структуры, в которых 13 протофиламентов, состоящих из гетеродимеров α- и β-тубулина, уложены по окружности полого цилиндра. Внешний диаметр цилиндра около 25 нм, внутренний — около 15.

Один из концов микротрубочки, называемый плюс-концом, постоянно присоединяет к себе свободный тубулин. От противоположного конца — минус-конца — тубулиновые единицы отщепляются.

Центр организации микротрубочек  — структура эукариотической клетки, на которой собираются микротрубочки. ЦОМТ имеет две основные функции — сборка жгутиков и ресничек, а также образование нитей веретена деления в ходе митоза и мейоза.

Участок сборки микротрубочек может быть визуализован в клетке при помощи иммуногистохимии по наличию γ-тубулина. У животных классифицируют два основных типа ЦОМТ — на основе базальных телец ресничек и центриолей, принимающая участие в образовании веретена деления.

Центриоль

В большинстве клеток животных в течение интерфазы присутствует одна центросома, обычно располагающаяся возле ядра. В ней до S-периода содержится одна центриоль. В ходе S-периода достраивается вторая центриоль. Микротрубочки заякорены своими (-)концами на центросоме, что предотвращает их полный распад. Обычно отходящие от центросомы микротрубочки характеризуются динамической нестабильностью: они медленно растут, а затем быстро распадаются почти целиком начиная с (+)конца. Полярность микротрубочек важна для везикулярного транспорта: как правило, кинезины перемещают мембранные пузырьки с грузом к периферии клетки, двигаясь к (+)концам, а динеины — в противоположном направлении.

Базальное тельце

В эпителиальных клетках животных, клетках сетчатки глаза и других нервных клетках — рецепторах, а также в клетках многих протистов ЦОМТы, содержащие центриоли, служат базальными тельцами ресничек и жгутиков.

У клеток зародышей животных и у большинства клеток самых разных тканей взрослого организма есть первичная ресничка, также обладающая базальным тельцем . Она играет важную роль в межклеточной сигнализации, миграции клеток и других процессах.

На базальных тельцах, как и на других ЦОМТах, происходит нуклеация микротрубочек, а заякоривание (-)концов обеспечивает их стабилизацию. Базальные тельца обеспечивают рост ресничек и жгутиков, а также (вместе с корневыми структурами) закрепляют их на поверхности клетки.

2. Митохондрии. Методы изучения.

Митохондрии - это органеллы размером с бактерию (около 1 х 2 мкм). Они найдены в большом количестве почти во всех эукариотических клетках. Обычно в клетке содержится около 2000 митохондрий, общий объем которых составляет до 25% от общего объема клетки. Митохондрия ограничена двумя мембранами - гладкой внешней и складчатой внутренней, имеющей очень большую поверхность. Складки внутренней мембраны глубоко входят в матрикс митохондрий, образуя поперечный перегородки - кристы. Пространство между внешней и внутренней мембранами обычно называют межмембранным пространством.

3. Регенерация тканей

Регенерация - восстановление клеток, направленное на поддержание функциональной активности данной системы. В регенерации различают такие понятия, как форма регенерации, уровень регенерации, способ регенерации.

Формы регенерации:

• физиологическая регенерация - восстановление клеток ткани после их естественной гибели (например, кроветворение);

• репаративная регенерация - восстановление тканей и органов после их повреждения (травмы, воспаления, хирургического воздействия и так далее).

 

Уровни регенерации соответствуют уровням организации живой материи:

• клеточный (внутриклеточный);

• тканевой;

• органный.

Способы регенерации:

• клеточный способ (размножением (пролиферацией) клеток);

• внутриклеточный способ (внутриклеточное восстановление органелл, гипертрофия, полиплоидия);

• заместительный способ (замещение дефекта ткани или органа соединительной тканью, обычно с образованием рубца, например: образование рубцов в миокарде после инфаркта миокарда).

Факторы, регулирующие регенерацию:

• гормоны - биологически активные вещества;

• медиаторы - индикаторы метаболических процессов;

• кейлоны - это вещества гликопротеидной природы, которые синтезируются соматическими клетками, основная функция - торможение клеточного созревания;

• антагонисты кейлонов - факторы роста;

• микроокружение любой клетки.

 

 

 

 

 

 

Билет № 11 
1. Клеточный цикл эукариот

Клеточный цикл – совокупность явлений между 2я последовательными делениями клетки или между ее образованием и гибелью.

1. Интерфаза  - период клеточного роста
2. Митоз – период клеточного деления

Интерфаза (почти все время клеточного цикла)

Фазы: 1 пресинтетическая G1

2 синтетический S

3 постсинтетический G2

Митоз включает 2 стадии: митоз (деление клетки) и цитокинез (деление цитоплазмы)

Интерфаза

G1 – активный рост клетки, синтез белка и рнк. Клетка достигает нормальных размеров и восстанавливает необходимый набор органелл. Синтез «запускающих» белков (активаторы S периода)

S – в ядре происходит репликация (удвоение количества ДНК) (2с→4с). Число хромосом не изменяется (2n), но каждая содержит 2 сестринские хроматиды. Синтез гистоновых белков. В цитоплазме происходит удвоение центриолей.

G2 – синтез веществ, необходимых для деления клетки. Синтезируется белок микротрубочек тубулин, необходимый для веретена деления.

Митоз

Профаза – реорганизация ядра и формирование митотического аппарат. Происходит конденсация и укорачивание хромосом и их можно наблюдать в световой микроскоп. У животных и низших растений – центриоли расходятся к полюсам клетки. У высших растений центриоли отсутствуют и на полюсах и на полюсах – аморфный центр организации микротрубочек. Уменьшается кол. гЭПР. Аппарат Гольджи распадается на мелкие пузырьки и цистерны. Ядрышки уменьшаются в размерах и исчезают. В поздней профазе ядерная оболочка разрушена. Белки образующие ядерную ламину  деполяризуются, разбираются, расходятся. Начинают формироваться нити веретена деления.