Шпаргалки по "Микробиологии"

Не  синтезируют экзотоксин. Поражение  тканей вызывает ряд веществ –  липиды, мураминдипептид, фтионовые  кислоты, сульфатиды, туберкулин, возникают  специфические гранулемы и поражение  тканей. Токсическое действие оказывает корд-фактор, разрушает митохондрии клеток, нарушает функцию дыхания.

Патогенетически важным является действие на организм инфицированного человека туберкулина. Очищенный от примесей туберкулин (PPD – очищенный протеиновый дериват) является белком. Внутрикожное введение туберкулина вызывает у инфицированных людей местную воспалительную реакцию  в виде инфильтрата и покраснения (реакция Манту). Неинфицированные люди реакции на туберкулин не дают. Эту  пробу применяют для выявления  инфицированных, сенсибилизированных  людей.

Иммунитет. Заражение не всегда приводит к развитию заболевания, это зависит от состояния микроорганизмов. Восприимчивость усиливается в неблагоприятных условиях (изнурительный труд, недостаточное и неполноценное питание, плохие жилищные условия и т.д.). Способствуют развитию туберкулезного процесса и эндогенные факторы – сахарный диабет; психические болезни и др. Значение АТ в формировании сопротивляемости к туберкулезной инфекции до сих пор неясно. Считается, что АТ являются «свидетелями» иммунитета и не оказывают ингибирующего действия на возбудитель.

Большое значение имеет клеточный иммунитет. По РБТЛ, цитотоксическому действию лимфоцитов на клетки-«мишени», содержащие АГ микобактерии, выраженности РТММ судят о течении заболевания. Т-лимфоциты после контакта с АГ синтезируют медиаторы, усиливающие фагоцитарную активность макрофагов. При подавлении функции Т-лимфоцитов туберкулезный процесс становится быстротечным и тяжелым.

Микобактерии  туберкулеза разрушаются внутриклеточно в макрофагах. Фагоцитоз является одним из механизмов, приводящих к  освобождению организма от микобактерии туберкулеза, но он часто незавершенный.

Другой  важный механизм – фиксация микобактерий в очагах благодаря образованию  инфекционных гранулем при участии  Т-лимфоцитов, макрофагов и других клеток. В этом проявляется защитная роль ГЗТ.

Иммунитет при туберкулезе раньше называли нестерильным. Значение имеет не только сохранение живых бактерий, поддерживающих повышенную сопротивляемость к суперинфекции, но и явление «иммунологической  памяти». При туберкулезе развивается  реакция ГЗТ.

Лабораторная диагностика. Диагностика:

1) микроскопические исследование. Из мокроты делают два мазка. Один окрашивают по Цилю—Нильсену, второй обрабатывают флюорохромом и исследуют с помощью прямой флюоресцентной микроскопии;

2) бактериологическое исследование. Является обязательным. В ходе исследования определяется чувствительность к туберкулостатическим препаратам.

Применяют ускоренные методы обнаружения микобактерий в посевах, например по методу Прайса. Микроколонии позволяют увидеть  наличие корд-фактора, когда образовавшие его бактерии складываются в косы, цепочки, жгуты;

3) полимерная цепная реакция (ПЦР). Применяется при внелегочных формах;

4) серодиагностика – ИФА, РПГА, реакция флюоресценции. Не является ведущим методом;

5) проба Манту с туберкулином – аллергологический метод. Туберкулин – препарат из убитой культуры микобактерий. Проба ставится при отборе лиц для ревакцинации для оценки течения туберкулезного процесса;

6) микрокультивирование на стеклах в среде Школьникова;

7) биологический метод. Используется редко, когда возбудитель трудно выделить из исследуемого материала. Материалом от больного заражают лабораторных животных (морских свинок, кроликов). Наблюдение ведут до гибели животного, а затем исследуют пунктат его лимфатических узлов.

Материалом  для микробиологического исследования в зависимости от локализации  процесса служат мокрота, гной, моча, спинномозговая жидкость, испражнения.

Профилактика и лечение. Для специфической профилактики – живая вакцина БЦЖ-BCG (Bacille Calmette–Guerin). вакцинируют всех новорожденных на 5–7-й день жизни внутрикожно. Ревакцинация – лицам с отрицательной туберкулиновой пробой с интервалом в 5–7 лет до 30-летнего возраста. Создают т.о. инфекционный иммунитет, при котором возникает реакция ГЗТ.

Для лечения – АБ, химиотерапевтические препараты I ряда: тубазид, фтивазид, изониазид, стрептомицин, дигидрострептомицин, ПАСК и II ряда: (при неэффективности препаратов первого ряда): этионамид, циклосерин, амикацин,канамицин, рифампицин, виомицин, аминосалицилат натрия (ПАСК),. Также проводится десенсибилизирующая терапия и стимуляция естественных защитных механизмов организма.

Особенности терапии при туберкулезе:

1) лечение должно быть начато как можно раньше, сразу после выявления заболевания;

2) терапия всегда комбинированная – используется не менее двух препаратов;

3) проводится длительно (4–6 месяцев), что связано с большой продолжительностью жизненного цикла микобактерий;

4) должна быть непрерывной, так как перерывы ведут к формированию устойчивости возбудителя и хронизации процесса.

 

Грипп

Относятся к семейству ортомиксовирусов. Выделяют вирусы гриппа типов А, В и С.

Вирус гриппа имеет сферическую форму. Нуклеокапсид спиральной симметрии, представляет собой рибонуклеопротеиновый тяж (белок NP), уложенный в виде двойной спирали, которая составляет сердцевину вириона. С ней связаны РНК-полимераза и эндонуклеазы. Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка М, который соединяет рибонуклеопротеиновый тяж с двойным липидным слоем внешней оболочки. Среди белков суперкапсидной оболочки большое значение имеют два:

1) нейраминидаза;

2) гемагглютинин.

Геном вируса представлен минус-нитевой фрагментированной молекулой РНК. Репликация ортомиксовирусов первично реализуется в цитоплазме инфицированной клетки. Синтез вирусной РНК осуществляется в ядре.

Вирусы  гриппа А, В и С отличаются друг от друга по типоспецифическому антигену, связанному с белками М и NP. Более узкую специфичность вируса типа А определяет гемагглютинин (Н-антиген). Изменчивость Н-антигена определяет:

1) антигенный дрейф – изменения Н-антигена, вызванные точечными мутациями в гене, контролирующем его образование;

2) антигенный шифт – полная замена гена, в основе которой лежит рекомбинация между двумя генами.

Первоначально возбудитель реплицируется в  эпителии верхних отделов дыхательных  путей, вызывая гибель инфицированных клеток. Через поврежденные эпителиальные  барьеры вирус проникает в  кровоток. Вирусемия сопровождается множественными поражениями эндотелия  капилляров с повышением их проницаемости. В тяжелых случаях наблюдают  обширные геморрагии в легких, миокарде и различных паренхиматозных  органах.

Основные  симптомы включают в себя быстрое  повышение температуры тела с  сопутствующими миалгиями, насморком, кашлем, головными болями.

Основной  путь передачи возбудителя – воздушно-капельный.

Лабораторная  диагностика:

1) экспресс-диагностика – определение антигенов вируса в цитоплазме эпителия носа и носоглотки в мазках-отпечатках методом ИФА;

2) заражение культур клеток или куриных эмбрионов отделяемым носа, мокротой или смывами из носоглотки (получают в первые дни болезни);

3) серодиагностика (РСК, РТГА, реакция ингибирования активности фермента).

Специфическая профилактика:

1) противогриппозный иммуноглобулин человека;

2) живые и инактивированные вакцины.

Лечение: производные амантадина (ремантадин).

Сем PARAMYXOVIRIDAE (лат. para – около, myxa – слизь) включает три патогенных: Paramyxavirus (парагриппа и эпидемического паротита), Morbillivirus (корь) и Pneumovirus (респираторно–синтициальный).

Структура и химический состав. Вирионы сферической формы. В центре – нуклеокапсид со спиральным типом симметрии, окружен внешней оболочкой с шиловидными отростками. Односпиральная «–» РНК. В составе нуклеокапсида есть несколько вирусспецифических ферментов, в том числе РНК-полимераза. Имеет суперкапсид и 3 вирусспецифических белка: 2 – гликопротеины NH (обладают гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью), 3 – белок F (участвует в слиянии клеточных мембран с вирусной оболочкой).

АГ. 2 видоспецифических АГ: внутренний S- (нуклеопротеин) и наружный Y-АГ (гликопротеины шиповидных отростков). Общий АГ для всего семейства отсутствует. У ряда парамиксовирусов Y-АГ содержит 2 самостоятельных компонента – гемагглютинин (Н-АГ), др – нейраминидаза (N-АГ).

Репродукция. Парамиксовирусы с помощью рецепторов адсорбируются на клетках. Проникновение – путем рецепторного эндоцитоза или при слиянии вирусной оболочки с цитоплазматической мембраной. Репликация вирусной РНК происходит в цитоплазме. При формировании вирионов происходит модификация отдельных участков мембраны клетки-хозяина (снаружи встраиваются гликопротеины, изнутри – мембранный белок). К этим участкам мембраны по актиновым нитям цитоскелета транспортируются вирусные нуклеокапсиды. Выход вирусных частиц происходит путем почкования. В цитоплазме инфицированных клеток образуются ацидофильные включения.

Экология и распространение. Высокочувствительны к действию детергентов, дезинфектантов, к изменениям температуры. Источник заражения – больные и вирусоносители. Передаются вирусы аэрозольным, иногда контактным путем. Наиболее тяжело протекает у детей раннего возраста. При паротите, кори больной опасен для окружающих начиная с инкубационного периода.

Диагностика. Вирус выделяют из материала (слюна, моча, кровь, смывы из зева и др.) в культуре клеток. Идентификацию вирусов производят по характеру ЦПД и в серологических реакциях (РСК, РВН, РТГА). Для обнаружения вирусных АГ в материале используют иммунофлюоресцентный метод.

Серодиагностика проводится в РСК, РВН, РТГА – с  парными сыворотками больных.

ВИРУСЫ  ПАРАГРИППА ЧЕЛОВЕКА (ВПГЧ)

Известно 5 серотипов вируса парагриппа (ВПГЧ-1–  ВПГЧ-5).

Парагриппозные  вирусы обладают гемадсорбирующей активностью, которая проявляется в инфицированных культурах клеток при добавлении эритроцитов морской свинки. Имеют  гемагглютинирующие свойства (у разных серотипов выражены по разному). Все серотипы обладают нейраминидазной активностью и умеренно выраженными гемолитическими и симпластобразующими свойствами. Репродуцируются в первичных, и перевиваемых культурах клеток человека и обезьян. Выраженность ЦПД варьирует в зависимости от серотипа и штамма. Вирусы ВПГЧ-1 и ВПГЧ-4 типов наименее цитопатогенны.

Патогенез. Парагриппозные инфекции протекают по типу ОРЗ. Среди ОРЗ встречается примерно в 10% случаев. Вирусы репродуцируются в эпителиальных клетках слизистой носоглотки, затем поступают в кровь и вызывают вирусемия.

Иммунитет. Типоспецифический гуморальный, сохраняется в течение нескольких лет. В сыворотке обнаруживаются комплементсвязывающие, вируснейтрализующие, антигемагглютинирующие АТ. Большое значение имеют SIgA.

Вакцинопрофилактика не применяется.

Сем ORTHOMYXOVIRIDAE (греч. orthos – правильный, myxa – слизь) – вирусы гриппа типов А, В и С, как и парамиксовирусы, обладают сродством к муцину. Вирус типа А поражают человека и некоторых животных и птиц. Вирусы типов В и С патогенны только для людей.

При классификации возникают трудности, связанные с АГ изменчивостью. Вирусы подразделены на три типа А, В и С.

К типу А отнесены несколько подтипов, отличающихся друг от друга по АГ (NH). По классификации ВОЗ вирусы гриппа типа А разделены на 13 подтипов по гемагглютинину (Н1–13) и на 10 по нейраминидазе (N1–10). Из них в состав вируса гриппа человека типа А входит 3 гемагглютинина (H1–3) и две нейраминидазы (N1 и N2). Но недостатком этой классификации является объединение в единый подтип H1 трех вирусов, отличающихся по характеру вызываемых ими пандемий и эпидемий прошлых лет.

Вирусы типов В и С имеют стабильные АГ, хотя гемагглютинин вируса гриппа В также претерпевает во времени антигенный дрейф.

НОМЕНКЛАТУРА  включает ряд обязательных показателей:

тип вируса (А, В и С);

естественный  хозяин, если не человек Þ животное;

географическое  место выделения;

лабораторный  номер штамма;

год выделения

у вирусов  типа А в скобках указывается подтип гемагглютинина и нейраминидазы (Хабаровск/90/77 (H1N1)).

Структура и химический состав. Имеет сферическую форму, реже – нитевидные формы. Нуклеокапсид спиральной симметрии – это РНП тяж, уложенный в виде двойной спирали, которая составляет сердцевину вириона. С ней связаны РНК-полимераза (белок Р1) и эндонуклеазы (Р3). Сердцевина окружена мембраной, состоящей из белка M (соединяет РНП с липидным бислоем внешней оболочки и шиловидными отростками, состоящими из Н и N). Липиды и углеводы в составе внешней оболочки и имеют клеточное происхождение. Геном – фрагментированная РНК (вирусы типов А и В имеют 8 фрагментов, из них 5 кодируют по одному белку, а 3 – по 2 белка).

АГ. Вирусы гриппа А, В и С отличаются по типоспецифическому АГ, связанному с РНП и М-матриксным белком, стабилизирующим структуру вириона. Эти АГ выявляются в РСК. Более специфичны для вируса типа А два других АГ – Н и N. Гемагглютинин – сложный гликопротеид, обладает протективными свойствами, индуцирует в образование вируснейтрализующих АТ, выявляемых в РТГА. Изменчивость Н-АГ определяет антигенный дрейф и шифт вирусов гриппа. АГ дрейф – незначительные изменения Н-АГ, вызванные точечными мутациями. При накоплении изменений в потомстве возникает изменение АГ свойств Н. АГ шифте – полная замена гена, в основе – рекомбинации между двумя вирусами. Это приводит к смене подтипа Н или N, и появлению принципиально новых АГ вариантов → крупные эпидемии и пандемии.

С помощью  гемагглютинина вирусы адсорбируется  на чувствительных клетках (в т.ч. эритроцитах, в результате происходит их склеивание и гемолиз).

Нейраминидаза – фермент, катализирующий отщепление сиаловой кислоты от субстрата. Обладает АГ свойствами, участвует в освобождении вирионов из клеток хозяина.