Контрольная работа по "Биологической химии"
Контрольная работа, 29 Ноября 2014, автор: пользователь скрыл имя
Краткое описание
Задание 10. Влияние концентрации фермента на скорость реакции. Нарисуйте график этой зависимости.
Решение: При высокой концентрации субстрата (многократно превышающей концентрацию фермента) и при постоянстве других факторов скорость ферментативной реакции пропорциональна концентрации фермента. Поэтому зная скорость реакции, катализируемой ферментом, можно сделать вывод о его количестве в исследуемом материале. При проведении ферментативной реакции в условиях избытка субстрата скорость реакции будет зависеть от концентрации фермента. Графическая зависимость такой реакции имеет вид прямой линии (рис.1).
Вложенные файлы: 1 файл
биохим. 1.docx
— 1.33 Мб (Скачать файл)Функции крови:
1) транспортная. Данная функция
крови крайне разнообразна. Кровь
осуществляет перенос газов (за
счет способности гемоглобина
связывать кислород и углекислый
газ), различных питательных и
биологически активных веществ;
2) трофическая. Питательные
вещества поступают в организм
с пищей, затем расщепляются в
желудочно-кишечном тракте до
белков, жиров и углеводов, всасываются
и переносятся кровью к различным
органам и тканям;
3) дыхательная. Осуществляется
в виде транспорта кислорода
и углекислого газа. Оксигенированный
в легких гемоглобин (оксигемоглобин)
доставляется кровью по артериям
ко всем органам и тканям, где
происходит газообмен (тканевое
дыхание), кислород расходуется на
аэробные процессы, а углекислота
связывается гемоглобином крови (карбоксигемоглобинам)
и по венозному кровотоку доставляется
в легкие, где вновь происходит оксигенация;
4) защитная. В крови имеются клетки и системы, обеспечивающие неспецифическую (система комплемента, фагоциты, NK-клетки) и специфическую (Т– и В-системы иммунитета) защиту;
5) экскреторная. Кровь выводит продукты распада макромолекул (мочевина и креатинин выводятся почками с мочой).
В совокупности эти функции обеспечивают гомеостаз (постоянство внутренней среды организма).
Составные компоненты крови:
1) клетки (форменные элементы);
2) жидкое межклеточное вещество (плазма крови).
Соотношение частей крови: плазма – 55 – 60%, форменные элементы – 40 – 45%.
Плазма крови состоит из:
1) воды (90 – 93%);
2) содержащихся в ней веществ (7 – 10%).
В плазме содержатся белки, аминокислоты, нуклеотиды, глюкоза, минеральные вещества, продукты обмена.
Функция плазмы – транспорт растворимых веществ.
В связи с тем что в крови содержатся как истинные клетки (лейкоциты), так и постклеточные образования (эритроциты и тромбоциты), в совокупности их принято именовать их в совокупности форменными элементами.
Качественный и количественный состав крови (анализ крови) – гемограмма и лейкоцитарная формула.
Гемограмма взрослого человека:
1) эритроцитов содержится:
а) у мужчин – 3,9 – 5,5 x 1012 в 1 л, или 3,9 – 5,5 млн в 1 мкл, концентрация гемоглобина 130 – 160 г/л;
б) у женщин – 3,7 – 4,9 x 1012, гемоглобин – 120 – 150 г/л;
2) тромбоцитов – 200 – 300 x 109 в 1 л;
3) лейкоцитов – 3,8 – 9 x 109 в 1 л.
Белковую фракцию плазмы составляет несколько десятков различных белков. Большая величина молекул дает основание относить их к коллоидам. Присутствие коллоидов в плазме обусловливает ее вязкость.
Белки плазмы различают по строению
и функциональным свойствам. Их количественное
и качественное определение производят
специальными методами электрофореза,
основанного на различной подвижности
белков в электрическом поле, ультрацентрифугирования,
иммуноэлектрофореза, при котором в электрическом
поле передвигаются целые комплексы связанных
со специфическими антителами молекул.
В плазме крови человека содержится примерно
200—300 г белка. Белки плазмы делят на две
основные группы: альбумины и глобулины. В глобулиновую
фракцию входит фибриноген.
Альбумины. Альбумины составляют около 60% белков плазмы. Их высокая концентрация, большая подвижность при относительно небольших размерах молекулы, определяют онкотическое давление плазмы. Большая общая поверхность мелких молекул альбумина играет существенную роль в транспорте кровью различных веществ, таких как билирубин, соли тяжелых металлов жирные кислоты, фармакологические препараты (сульфаниламиды, антибиотики и др.). Известно, что, например, одна молекула альбумина может одновременно связать 25—50 молекул билирубина.
Глобулины. Эту группу белков электрофоретически, по показателям подвижности, разделяют на несколько фракций: α1—, α2—, β3— и γ—глобулины. С помощью иммуноэлектрофореза эти фракции подразделяют на мелкие субфракции более однородных белков. Так, во фракции α1—глобулинов имеются белки, простетической группой которых являются углеводы. Эти белки называются гликопротеинами. В составе гликопротеинов циркулирует около 60% всей глюкозы плазмы. Еще одна группа — мукопротеины — содержит мукополисахариды, фракцию аз составляет медьсодержащий белок церулоплазмин, в котором на каждую белковую молекулу приходится восемь атомов меди. Таким образом связывается около 90% всей содержащейся в плазме меди. В плазме имеются еще тироксинсвязывающий и другие белки.
β—глобулины. участвуют в транспорте фосфолипидов, холестерина, стероидных гормонов, металлических катионов. Они удерживают в растворе около 75% всех липидов плазмы. Металлсодержащий белок трансферрин осуществляет перенос железа кровью. Каждая молекула трансферрина несет два атома железа.
γ—глобулины характеризуются самой низкой электрофоретической подвижностью. В эту фракцию белков входят различные антитела, защищающие организм от вторжения вирусов и бактерий. Количество этой фракции возрастает при иммунизации животных. К γ—глобулинам относятся также агглютинины крови.
Фибриноген занимает промежуточное положение между фракциями β— и γ—глобулинов. Этот белок образуется в клетках печени и ретикулоэндотелиальной системы; обладает свойством становиться нерастворимым в определенных условиях (под воздействием тромбина), принимать при этом волокнистую структуру, переходя в фибрин. Содержание фибриногена в плазме крови составляет всего 0,3%, но именно его переходом в фибрин обусловливается свертывание крови и превращение ее в течение нескольких минут в плотный сгусток. Сыворотка крови по своему составу отличается от плазмы только отсутствием фибриногена.
Альбумины и фибриноген образуются в печени, глобулины в печени красном костном мозге, селезенке, лимфатических узлах. При нормальном питании в организме человека за 1 сут вырабатывается около 17 г альбумина и 5 г глобулина. Период полураспада альбумина составляет 10—15 сут глобулина — 5 сут.
Белки плазмы вместе с электролитами являются ее функциональными элементами. С их помощью в значительной степени осуществляется транспорт веществ из крови к тканям. К числу транспортируемых компонентов относятся питательные вещества, витамины, микроэлементы, гормоны, ферменты а также конечные продукты обмена веществ.
Из питательных веществ самую большую часть составляют липиды. Их концентрация колеблется в широком диапазоне, но максимальное содержание отмечается после приема жирной пищи. На относительно постоянном уровне удерживаются переносимая плазмой глюкоза (44,4—66,6 ммоль/л) и аминокислотные остатки (4 мг%). Витамины могут переноситься либо в связанному белками, либо в свободном виде. Их уровень в плазме также подвержен колебаниям и зависит не только от их содержания в продуктах питания и синтеза кишечной флорой, но и от наличия особого фактора, облегчающего их всасывание в кишке.
Микроэлементы циркулируют в плазме в виде металлсодержащих белков (Со и др.) или белковых комплексов (Fe). Из конечных продуктов обмена наибольшей концентрации, особенно при тяжелой мышечной работе и недостатке кислорода, достигает молочная кислота. Не использованные организмом и подлежащие удалению конечные продукты обмена веществ (мочевина, мочевая кислота, билирубин, аммиак) доставляются плазмой к почкам, где и удаляются с мочой.
Белки плазмы в силу способности связывать большое число циркулирующих в плазме низкомолекулярных соединений участвуют, кроме того, в поддержании постоянства осмотического давления. Им принадлежит ведущая роль в таких процессах, как образование тканевой жидкости, лимфы, мочи, всасывание воды.
Разновидностью распределительной хроматографии является хроматография на бумаге, широко используемая в биохимических лабораториях, в том числе клинических, для разделения пептидов, аминокислот и других веществ. В качестве стационарной фазы при этом служит вода, адсорбированная целлюлозными цепями фильтровальной бумаги. Образец помещают на одном конце бумажной полосы, этим же концом бумагу погружают в подходящую смесь органических растворителей (например, бутанол–уксусная кислота–вода в определенных соотношениях). При движении растворителя по бумаге благодаря силе капиллярности происходит разделение компонентов смеси. Проявленную хроматограмму высушивают, а местоположение каждого из разделяемых веществ определяют химическими или физико-химическими методами.
В сыворотке крови здорового человека при электрофорезе на бумаге можно обнаружить 5 фракций: альбумины, б1-, б2-, в-, г-глобулины. Методом электрофореза в агаровом геле в сыворотке крови выделяют 7– 8 фракций, а при электрофорезе в крахмальном или полиакриламидном геле – до 16–17 фракций. Следует помнить, что терминология белковых фракций, получаемых при различных видах электрофореза, еще окончательно не установилась. При изменении условий электрофореза, а также при электрофорезе в различных средах (например, в крахмальном или полиак-риламидном геле) скорость миграции и, следовательно, порядок белковых зон могут меняться.
Еще большее число белковых фракций (свыше 30) можно получить методом иммуноэлектрофореза. Этот метод представляет собой своеобразную комбинацию электрофоретического и иммунологического методов анализа белков. Иными словами, термин «иммуноэлектрофорез» подразумевает проведение электрофореза и реакции преципитации в одной среде, т.е. непосредственно на гелевом блоке. При данном методе с помощью серологической реакции преципитации достигается значительное повышение аналитической чувстительности электрофоретического метода.
Зонный, или зональный, электрофорез
— это электрофорез на поддерживающих
средах (носителях). Зонный электрофорез можно
осуществить с использованием смоченных
буферным раствором (рН 8,6) полосок хроматографической
бумаги, ацетат —
целлюлозной пленки, агарового геля и
других носителей.
Если на электроды электрофоретической
камеры, в которой размещены
полоски носителя, подать напряжение,
то в созданном таким образом электрическом
поле ионы буфера и частицы нанесенного
на полосу субстрата (сыворотки или плазмы)
придут в состояние направленного движения.
При нанесении у катода 20—100мкл сыворотки
белки крови, заряженные отрицательно,
устремляются к аноду со скоростью, зависящей
от величины приложенного к электродам
напряжения, заряда белков, их молекулярной
массы, рН и ионной силы буфера. Заряд белков
при этом может быть образован первично
или вторично (в результате взаимодействия
с буфером).
Для характеристики процесса электрофореза
на носителе принято использовать понятия:
падение напряжения на 1см полосы (градиент
потенциала) – В/см и сила тока, приходящаяся
на 1см поперечного сечения полосы (плотность
тока), — мА/см. Под падением напряжения
(градиентом потенциала) следует понимать
распределение величины приложенного
к электродам напряжения на всем расстоянии
между электродами. Находится оно делением
величины выходного напряжения (регистрируемого
вольтметром источника постоянного напряжения)
на расстояние между электродами, точнее
— тот путь (в см), который преодолевают
электрически заряженные частицы (ионы,
электроны) от электрода к электроду. Так,
если он составляет 30см, а напряжение между
электродами — 150 В, то падение напряжения
(градиент потенциала) окажется равным
частному от деления 150 на 30, т.е. 5 В/см.
В зависимости от используемой величины
падения напряжения различают: низко —
(5 — 15), средне — (обычно 20 — 40) и высоковольтный
(превышающий 50 В/см) электрофорез.
Список литературы:
- Биохимия учебник/Под ред. Е.С. Северина – 3 изд., 2005г.
- Биохимия. Краткий курс с упражнениями задачами. / Под ред. Е.С. Северина. – М.:Гэотар-мед, 2001г.
- Биологическая химия : сб. ситуац. задач для студентов, обучающихся по специальности 060301 – Фармация (заочная форма) / сост. Л. В. Труфанова, Л.Л. Петрова, С.К. Антонова [и др.]/ – Красноярск: КрасГМУ, 2013. – 60 с.
- Березов Т.Т. Биологическая химия. М.,1998г.
- Марри Р. Биохимия человека.М.: Медицина, 2004г.