Біосинтез ціанкобаламіну штамом бактерії Pseudomonas denitrificans

Автор работы: Пользователь скрыл имя, 24 Ноября 2013 в 15:40, курсовая работа

Краткое описание

Робота присвячена виробництву вітаміну ціанкобаламіну (вітамін В12 ) на основі денітрифікуючих бактерій Pseudomonas denitrificans M-2436, який є необхідним для нормального функціонування організму. Курсова робота складається зі вступу,аналітичного огляду літератури, технологічної частини та використаної літератури з найменувань.
У курсовій роботі дано обґрунтування та викладено технологічний процес ділянки біосинтезу виробництва препарату, який включає блок допоміжних робіт та стадії вирощування культури. Складено аналітичний огляд літератури щодо властивостей, сучасних лікарських форм та галузей застосування вітаміну В12 на основі бактерій Pseudomonas denitrificans.

Содержание

ВСТУП……………………………………………………………………...….…..8
АНАЛІТИЧНИЙ ОГЛЯД ЛІТЕРАТУРИ
РОЗДІЛ 1. Значення вітамінів у життєдіяльності людини……….……....…...12
1.1. Вплив вітаміну на біохімічні процеси в організмі…………...….…14
1.2. Галузі застосування та потреби на ринку……………….……...…..16
РОЗДІЛ 2. Порівняльна характеристика методів одержання і промислових способів виробництва вітамінів……………………………………………..….19
2.1. Джерела одержання ціанкобаламіну………………………..…….….19
2.1.1. Мікробний синтез …………………………………………...19
2.1.2. Хімічний синтез…………………………………..………….21
2.1.3. Природні джерела……………………………………..……21
2.3. Вплив основних факторів і параметрів на процес біосинтезу ціанкобаламіну……………………………………………………………….…..21
ТЕХНОЛОГІЧНА ЧАСТИНА РОБОТИ
РОЗДІЛ 3. Характеристика кінцевого продукту – вітаміну ціанкобаламіну...23
РОЗДІЛ 4. Обґрунтування вибору технологічної схеми……………………...31
4.1. Вибір технології………………………………………………….…...31
4.2. Аналітичний огляд способів і методів реалізації мети виробництва………………………………………………………………….…..31
4.3. Обгрунтування вибору біологічного агента……………………….33
4.4. Обгрунтування вибору складу поживного середовища…………...34
4.4.1. Розрахунок складу поживного середовища……………36
4.5.Обгрунтування способу проведення біосинтезу……………….…...40
4.6. Обгрунтування вибору ферментаційного обладнання……….……40
РОЗДІЛ 5. Характеристика біологічного агенту………………………….…...43
5.1. Морфолого-культуральні ознаки……………………………………43
5.2. Фізіолого-біохімічі ознаки…………………………………………..44
5.3. Таксономічний статус………………………………………….…….45
5.4. Схема біотрансформації ростового субстрату в ціанкобаламін…....
РОЗДІЛ 6. Опис технологічного процесу біосинтезу ціанкобаламіну………47
6.1. Характеристика сировини, матеріалів, напівпродуктів…….……...47
6.2. Технологічна схема виробництва…………………………………...…
6.3. Опис технологічного процесу……………………………………….48
6.4. Контроль виробництва……………………….…………………..…..56
СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ……………………………………………………..….61

Вложенные файлы: 1 файл

курсач.doc

— 749.50 Кб (Скачать файл)

Визначення здатності спор до проростання.

На предметному  склі за допомогою спеціальних кілець готують вологу камеру. Спори пророщують у висячій краплі руслового або мелясного розчину, приготованого так само, як і для біохімічного контролю, але додатково профільтрованого і простерилізованого протягом 30 хв під тиском в 1 атм. Спорову суспензію готують у такому розведенні, щоб у краплі було 10-15 спор. Час пророщування 9 год. при 32˚С.

Загальна кількість  переглянутих спор в кожній партії 400-600. Підрахунком встановлюють кількість пророслих і непророслих спор. Схожість – це відношення пророслих спор до загальної кількості переглянутих, виражене у відсотках. Схожість повинна бути не вище 90 %.

Проводять визначення кількості спор в 1г посівного  матеріалу. Кількість спор у 1г посівного матеріалу має бути не менше 10,0 мільярдів.

Стерильність  процесу.

Строгою обов’язковою умовою приготування посівного матеріалу  є оберігання його від забруднення  сторонньою мікрофлорою тому всю  роботу необхідно здійснювати в  стерильних умовах.

Повітря робочих  приміщень повинно бути практично  стерильним, без пилу і мікроорганізмів, особливо без цвілі, що забруднюють  розливання. Стерилізацію повітря проводять  за допомогою бактерицидних ламп і пульверизацією розчинів антисептиків, з подальшим миттям підлоги.

Стіни, підлоги  і все обладнання приміщень обробляють 2 %-ним розчином фенолу, 5 %-вим розчином перекису водню або іншими дезінфікуючими засобами.

Чистоту повітря  перед роботою перевіряють висівом  на чашках Петрі з сусло – агаром і м'ясо – пептоним агаром протягом 10 хв.

Особливу увагу  слід звернути на приготування та стерилізацію поживних середовищ[12].

 

 

 

 

 

 

 

Схема мікробіологічного  контролю

Номер контрольної  точки та назва стадії

Об'єкт контролю і показники, що визначається

Методи контролю

Періодичність перевірки та порядок відбору  проб

Нормативна  характеристика показника, що визначається

Кт1.2.1 Перевірка правильності підготовлення дезінфікуючих та миючих засобів

Дезактин

Перевірка концентрації

Після приготування розчину 

Концентрація розчину дезактину повинна становити 0,5 %

Кт1.2.2 Перевірка правильності підготування дезінфікуючих та миючих засобів

Каустична сода

Перевірка концентрації та температури

Після приготування розчину 

Концентрація  розчину каустичної соди становить 2%, температура 85˚С

Кт1.4.1 Перевірка підготовки обладнання до роботи

Миття, ополіскування  ферментера

Перевірка температури

Під час тривалості операцій

Температура

70-80˚С

Кт1.4.3 Перевірка на герметичність обладнання

Вентилі, місця  з΄єднань

Перевірка тиску

Перед початком роботи

Тиск повинен  становити 1,5-2 атм.

Кт2.1Перевірка висоти забору повітря

Повітрозабірна  труба

Перевірка висоти

Під час приготування повітря

Н=10 м.

Кт2.2 Перевірка попереднього очищення повітря

Фільтр

Перевірка ступеня  очищення

Під час приготування повітря

Е=80 %

Кт2.3 Перевірка стислого повітря

Турбопресор

Перевірка тиску

Під час приготування повітря

Р=0,35–0,5 МПа

Кт2.4 Перевірка охолодженого повітря

Повітря

Перевірка температури

Під час приготування повітря

Т=40-60˚С

Кт2.5 Перевірка очищеного повітря в головному фільтрі

Повітря

Перевірка ступеня  очищення

Під час приготування повітря

Е=90 %

Кт2.6 Перевірка повітря в індивідуальному фільтрі

Повітря

Перевірка ступеня  очищення

Під час розташування повітря для поступових операцій

Е=99,99 %

КУО<1

Кт3.1.1 Перевірка приготування фосфорних солей

Фосфорні солі

Перевірка маси та концентрації

Масу перевіряють  до приготування розчину, а концентрацію після приготування розчину

М=1 г

С=0,15-1 %

Кт3.1.3 Перевірка правильності приготування дріжджового екстракту

Дріжджовий екстракт

Перевірка маси та концентрації

За розпорядженням

М=1 г

% частка в  розчині

Кт3.2.1 Перевірка стерилізації фосфорних солей

(NH4)2НРО4

Перевірка температури, тиску, тривалості

Під час стерилізації розчину

Т=131˚С

Р=0,15 МПа

t=40 хв

   Кт4.2Перевірка правильності вирощування культури в колбах на качалці

         Культура бактерії

                Температура, швидкість обертів  мішалки, тривалість культивування

                          Під час культивування

             Т=30˚С

W=3000 об/хв.

t=24 год

КУО(конт.)<1

 

Кт5.1Перевірка виробничого культивування

Культура бактерії

Перевірка температури, значення рН, тривалість культивування

Під час виробничого  культивування

Т=37˚С

рН=6,5-7

t=72 год

КУО(конт.)<1

 


Список  використаної літератури

  1. Промышленная биотехнология : под общей редакцией проф. Н. С. Егорова. – «Высшая школа», 1989. – 688 с.
  2. Гусев М.В., Минеева Л.А.Микробиология  : учебник для студ. биол. специальностей . – М.: Издательский цент «Академия», 2003. – 464с.
  3. О.В. Мосин Микробиологический синтез витамина В12// Журнал "Самиздат". -2006.
  4. Воробьева Л. И. Микробиологический синтез витаминов. М., 1982.
  5. Yongsmith В., Sonomoto K. et al. Production of vitamin B12 by immobilized cells of Propionic acid bacteria/Eur. J. Appl. Micr. Biotechnol. 1982. Vol. 16. P. 70-74.
  6. Безбородов А.М. Биохимические основы микробиологического синтеза. – М.: Легкая и пищевая про-сть,1984. – 304 с.
  7. https://www.google.ru/
  8. Виестур У.Э., Кристапсон М.Ж.,Былинкина Е.С. Культивирование микроорганизмов (Биоинженерные основы). – М.:Пищепромиздат,1980. – 230с.
  9. Губський Ю. І. Біологічна хімія: Підручник.-К.: 2007.-656 с.
  10. Егоров Н.С. Биотехнология: проблемы и перспективы. – М.:Высшая школа, 1997. – 240с.
  11. Калунянц К. А., Голгер Л. И., Балашов В Е. Обладнання мікробіологічних виробництв – М.: Агропромиздат, 1987. – 398с.
  12.   Методичні рекомендації щодо виконання санітарно-гігієнічних вимог та проведення мікробіологічного контролю у виробництві нестерильних лікарських засобів, затверджені наказом МОЗ України №502 від 14.12.2001.
  13. Определитель бактерий Берги. – 9-е изд. / Пер. под ред. Г.А. Заварзина. –М.: Мир, 1997. – Т. 1, 2. – 800 с.
  14. Пирог Т.П. Загальна мікробіологія: Підручник. – К.: НУХТ, 2004. – 471 с.
  15. Пирог Т.П., Ігнатова О.А. Загальна біотехнологія : Підручник. – К.:НУХТ, 2009. – 306с.
  16. Пат. РФ №2180001.
  17. Поморцсва Н. В. Перспективы получения витаминов и коферментов с помощью микроорганизмов/Химико-фармацевтический журнал. 1986.8. С. 965-976
  18. http://www.yandex.ru/

 

 

 

 

 

 

 

 


Информация о работе Біосинтез ціанкобаламіну штамом бактерії Pseudomonas denitrificans