Влияние вариабельности физиологических и цитолого-биохимических характеристик на радиочувствительность семенного потомства ольхи

Автор работы: Пользователь скрыл имя, 05 Декабря 2013 в 04:57, дипломная работа

Краткое описание

Цель исследования: выявить влияние вариабельности физиологических и цитолого-биохимических свойств ольхи кустарниковой, сформированной в условиях разного повышенного естественного радиационного фона (ПЕРФ), на радиочувствительность ее семенного потомства.
В связи с этим были поставлены следующие задачи:
1. Выявить влияние ПЕРФ на массу семян и их всхожесть.
2. Определить физиологические и цитолого-биохимические характеристики семенного потомства ольхи кустарниковой, произрастающей в условиях разного ПЕРФ.

Содержание

Условные обозначения
Введение
1. Литературный обзор
1.1. Адаптация растений
1.2. Внутривидовая изменчивость растений
1.3. Физиологические адаптации
1.4. Всхожесть - как адаптация к выживанию вида
1.5. Биохимические адаптации
1.5.1. Системы обеспечения надежности ДНК и репарация
генетических повреждений
1.5.2. Адаптации растений посредством антиоксидантных систем при действии стресса
1.5.3.Ферменты супероксиддисмутаза и пероксидаза
1.5.4. Естественные антиоксиданты
1.6. Радиоустойчивость семян
1.6.1. Механизмы радиоустойчивости
1.6.2. Внутривидовая радиочувствительность
1.6.3. Влияние внутривидового адаптационного потенциала на
радиочувствительность растений
2. Материал и методики
2.1. Характеристика ольхи кустарниковой
2.2. Лабораторный посев семян
2.3. Облучение семян
2.4. Анализ кривых «доза-эффект»
2.5. Определение количества низкомолекулярных антиоксидантов в проростках
2.6. Комплексный цитолого-биохимический метод дифференциальной оценки активности генома в процессах репликации, трансляции, репарации и его общей устойчивости
2.7. Определение активности пероксидазы
2.8. Определение активности супероксиддисмутазы
2.9. Цитологический анализ
2.10. Статистическая обработка результатов
3. Результаты и обсуждение
3.1. Влияние повышенного естественного радиационного фона на массу семян и их всхожесть
3.2. Физиологические и цитолого-биохимические характеристики семенного потомства ольхи кустарниковой, произрастающей в условиях ПЕРФ
3.3 Вариабельность коэффициентов антиоксидантной защиты, общей активности генома, репарации, общей относительной устойчивости генома клеток и радиочувствительность ольхи кустарниковой
Выводы
Список использованной литературы

Вложенные файлы: 1 файл

Радиоустойчивость.doc

— 1.22 Мб (Скачать файл)

  Влияние  повышенного естественного  радиационного фона произрастания  ольхи кустарниковой на расчетные  значения, характеризующие антиоксидантную защиту (kаоз), репарацию (kреп), общую относительную активность (kаг) и устойчивость генома (kуг) клеток проростков корневой меристемы, значения квазипороговой дозы (Dq) и tgα угла наклона дозовой кривой.

растения

kаоз

kреп

kоаг

kуг

Dq, Гр*

tgα*

1

2

3

4

5

6

7

20 мкР/ч (n=10)

1

1,4

1,1

0,2

1,3

11,0±1,10

0,5±0,10

2

1,3

0,3

0,7

0,8

10,0±1,00

0,5±0,10

3

1,0

1,8

0,6

2,0

4,0±0,40

0,5±0,10

4

0,8

4,8

3,7

1,0

3,0±0,30

0,8±0,10

5

1,0

0,8

0,7

1,0

3,0±0,30

0,4±0,04

6

0,9

1,3

0,5

1,7

9,0±0,90

0,4±0,04

7

0,6

0,9

0,7

1,0

10,0±1,00

0,5±0,10

8

1,1

0,1

0,2

0,5

3,0±0,30

0,5±0,10

9

0,9

1,8

0,7

1,7

3,0±0,30

0,5±0,10

10

1,0

3,1

2,1

1,2

3,0±0,30

0,5±0,10

X

1,0

1,6

1,0

1,3

6,0±0,60

0,5±0,05

100 мкР/ч (n=10)

13

1,4

1,4

0,8

1,6

3,3±,030

0,2±0,02

18

0,8

4,8

4,5

0,9

6,6±0,70

1,7±0,20

19

1,9

2,4

0,9

2,3

10,0±1,00

0,3±0,03

20

0,7

1,0

0,2

2,8

13,0±1,30

0,8±0,10

21

0,8

0,1

0,2

0,4

9,0±0,90

0,6±0,10

22

0,5

1,2

0,7

1,1

4,0±0,40

0,6±0,10

28

1,5

2,0

0,6

2,4

13,5±1,40

0,7±0,10

29

0,7

1,4

0,4

2,1

18,0±1,80

1,5±0,20

30

1,2

1,9

0,8

1,8

12,1±1,20

1,0±0,10

31

0,3

1,9

0,5

2,0

10,0±1,00

1,1±0,10

Х

1,0

1,8

1,0

1,7

10,0±1,00

0,8±0,08


 

 

1

2

3

4

5

6

7

300 мкР/ч (n=11)

2

1,2

0,8

0,6

1,3

18,5±1,90

0,5±0,10

3

0,7

3,0

2,1

1,1

4,0±0,40

0,3±0,03

4

0,4

0,1

0,3

0,2

5,0±0,50

0,8±0,10

5

0,9

0,8

0,4

1,4

7,0±0,70

1,0±0,10

6

0,8

1,9

1,8

0,9

7,0±070

0,9±0,10

7

1,3

0,1

0,8

0,7

5,0±0,500

0,4±0,04

8

1,6

4,5

2,7

1,6

19,0±1,90

0,5±0,10

9

0,5

1,7

0,5

1,9

8,0±0,80

0,4±0,04

10

0,7

0,1

0,3

0,3

8,0±0,80

0,5±0,10

11

1,3

1,0

0,6

1,5

19,0±1,90

0,4±0,04

14

1,6

1,4

0,5

2,2

8,0±0,80

0,4±0,04

X

1,0

1,4

1,0

1,0

9,8±1,00

0,6±0,10

 500 мкР/ч (n=6)

3

1,6

0,2

1,6

0,9

13,7±0,40

0,5±0,01

12

0,9

0,9

0,1

4,9

17,7±0,80

0,6±0,10

13

0,7

1,4

0,6

1,5

18,7±0,90

0,6±0,10

16

0,7

1,3

0,8

1,2

15,5±0,60

0,6±0,10

17

1,1

0,1

0,8

0,5

15,6±0,60

0,3±0,03

18

0,9

2,2

2,0

0,9

13,5±0,40

0,2±0,02

X

1,0

1,0

1,0

1,6

15,8±0,60

0,4±0,04


 

 

1

2

3

4

5

6

7

700 мкР/ч (n=9)

1

0,7

1,1

0,5

1,4

2,0±0,20

1,1±0,10

4

1,1

2,3

1,3

1,4

7,0±0,70

0,7±0,10

5

0,7

0,1

0,2

0,3

7,5±0,80

0,7±0,10

7

1,6

1,1

1,3

1,2

2,0±0,20

1,0±0,10

8

0,6

1,9

0,6

1,9

6,0±0,60

1,0±0,10

9

0,8

2,0

1,1

1,3

1,0±0,10

0,9±0,10

32

1,5

2,2

0,5

2,9

1,0±0,10

0,6±0,10

35

1,3

3,0

2,8

1,2

3,2 ±0,30

1,2±0,10

36

0,7

1,1

0,5

1,4

7,0±0,70

0,7±0,10

Х

1,0

1,6

1,0

1,4

4,0±0,40

0,9±0,10


Х - среднее значение  по выборке;  *р ³0,1

                                          

 

 

 

Репаративная способность клеток растений выраженная вычисленным коэффициентом, изменялась от 0,3 до 4,8  у контрольной выборки; от 0,1 до 2,8 у растений произрастающих на фоне 700 мкР/ч. Средние значения репаративной способности клеток данных выборок находились на одном уровне (1,6). Репаративная способность клеток растений, произрастающих на фоне 100  мкР/ч, варьировала от 0,1 до 4,8. Среднее значение было равно 1,8. На 300 мкР/ч значения этого коэффициента изменялись от 0,1 до 4,5. Среднее по выборке составило 1,4. У растений произрастающих на фоне 500 мкР/ч коэффициент репарации варьировал от 0,1 до 2,2. Среднее значение по выборке равно 1,0.

Общая относительная активность генома клеток растений в среднем по выборки  у исследованных фонов достоверно статистически не отличалась. Варьирование значений активности у контроля было от 0,2 до 3,7 . На фоне 100 мкР/ч – от 0,2 до 4,5. На фоне 300 мкР/ч – от 0,3 до 2,7. На фоне 500 мкР/ч – от 0,1 до 2,0. 700 мкР/ч – 0,2 до 2,8.

Установлено, что средняя устойчивость генома клеток растений произрастающих на фоне 100 мкР/ч была максимальной (1,7) и варьировала от 0,4 до 2,8. Устойчивость генома клеток контрольной выборки и растений, произрастающих на фоне 700 мкР/ч, отличалась несущественно. Изменение значений устойчивости контрольной выборки составило от 0,5 до 2,0; у 700 мкР/ч – от 0,3 до 2,9. На 300 мкР/ч – среднее значение устойчивости генома было равным 1,0; варьирование значений находилось в диапазоне 0,2 до 2,2.  На 500 мкР/ч – среднее значение устойчивости генома соответствовало 1,6; варьирование значений находилось в диапазоне 0,9 до 4,9.

 Следует отметить, что среднее значение квазипороговой дозы было максимально у проростков произрастающих на фоне 500 мкР/ч – 15,8 Гр.  А самая низкая  «доза перегиба» у  выборки с фона 700 мкР/ч – 4,0 Гр.

Резистентность  самих приспособительных систем, включая системы репарации, которая оценивается по тангенсу угла наклона дозовой кривой- tga, которая изменялась в небольшом диапазоне: у контроля от 0,4 до 0,5, среднее значение по выборке равно 0,5. У 100 мкР/ч - tga изменялся от 0,2 до 1,7, среднее значение по выборке составило 0,8. У 300 мкР/ч - он варьировал от 0,3 до 1,0. У 500 мкР/ч - tga варьировал от 0,2 до 0,6 при среднем значении – 0,4. А у 700 мкР/ч – от 0,7 до 1,2, среднее значение по выборке составило 0,9.

Таким образом, установлено, что по показателю антиоксидантной защиты растения исследованных фонов находились примерно на одном уровне. Репаративная способность клеток организма растений с разных фонов ПЕРФ также различались несущественно. Исключение составили растения, произрастающие на фоне 500 мкР/ч, которые имели минимальную репаративную способность.

Следует отметить, что общая относительная  активность генома клеток минимальна у растений существующих на фоне 100 мкР/ч и существенно отличается от остальных растений, активность генома которых сохраняется по мере увеличения фона произрастания. Относительная устойчивость генома клеток  была максимальна у растений фона 100 мкР/ч  и минимальна - у фона 300 мкР/ч среди выборок. Потенциал устойчивости растений к острому облучению также был максимален у выборки произрастающей на фоне 100 мкР/ч.  Способность выживания организма растения, произрастающего на фоне 700 мкР/ч при наложении радиационного стресса, резко снижалась.

Произрастание организма в условиях ПЕРФ налаживает определённый отпечаток на физиологические и цитолого-биохимические характеристики семенного потомства, которые являются адаптационным потенциалом существования данного вида в данных условиях обитания.

 

3.3. Вариабельность коэффициентов антиоксидантной защиты, общей активности генома, репарации, общей относительной устойчивости генома клеток и радиочувствительность  ольхи  кустарниковой

На  рис.3.4А показаны вариационные кривые выживаемости проростков семенного потомства ольхи кустарниковой, выросшей в условиях разного ПЕРФ. Видно, что вариабельность выживаемости проростков растений, выросших в условиях γ-фона от 100 до 700 мкР/ч, изменяется нелинейно. Но во всех вариантах значение вариабельности выше в 2÷3,8 раза, относительно контроля (20 мкР/ч; табл.3.3). Вычисленный коэффициент корреляции  (r=0,7) имеет положительное значение и указывает на достоверность этого явления. Максимальная вариабельность выживаемости была зафиксирована у семенного потомства ольхи, произрастающей в условиях 500 мкР/ч. Острое дополнительное облучение семян растений g-квантами 60Со дозой 250 Гр позволило определить изменение вариабельности выживаемости проростков, выросших из семян растений, хронически облучаемых природной радиацией (рис.3.4.Б; табл.3.3.). Установлено, что с увеличением экспозиционной дозы произрастания материнских растений уменьшается вариабельность выживаемости проростков на 10–50%. В варианте с облучением  семян наблюдалась обратная  корреляция  (r = - 0,6) между вариабельностью признака и фоном произрастания семенного потомства.

Как упоминалось выше,  важную роль в формировании адаптаций к экологическим  условиям обитания у растений играют эволюционно сформированные антиоксидантные и геномные защитные системы клеток, определяющие общую устойчивость организмов

В табл.3.3. представлены значения коэффициентов вариабельности общей антиоксидантной защиты, общей активности генома, репарации и общей относительной устойчивости генома клеток проростков, семян растений, выросших в условиях разного ПЕРФ. Установлено, что вариабельность общей антиоксидантной защиты клеток проростков также увеличивается в 1,4-2,0 раза и изменяется нелинейно по мере роста γ-фона произрастания материнских растений.

 

 

 

 

 

 

Таблица 3.3.

Вариабельность (%) выживаемости проростков, коэффициентов антиоксидантной защиты, общей активности генома, репарации, общей относительной устойчивости генома клеток и радиочувствительность (Dq, Гр и tga) семенного потомства ольхи кустарниковой, выросшей в условиях разного ПЕРФ

Информация о работе Влияние вариабельности физиологических и цитолого-биохимических характеристик на радиочувствительность семенного потомства ольхи