Апоптозды идентификациялау әдістері

Апоптозды идентификациялау әдістері

• Морфологиялық және биохимиялық белгілері 
• Морфологиялық әдіс
• Жарық-микроскоптары арқылы зерттеулер
• Флуоресцентті-микроскоптар арқылы зерттеулер
• Иммуногистохимиялық әдіс
• Горяев-Том камерасында санау

 

Жоспары:

                        
Апоптоз белгілері

 

• Морфологиялық

Сыртқы белгілері 

 

• Биохимиялық

Ішкі белгілері (энергия, зат алмасу)

 

• Клетка көлемінің кішіреюі
• Хроматин конденсациясы және фрагментациясы
• Сыртқы және цитоплазмалық мембрананың нығыздалуы

 

Морфологиялық әдіс

Жарық-микроскоптары  арқылы зерттеулер

 

• Бояу
• Витальды бояулар (тірі клеткаларды бояу)
• Фиксация
• Анықтау;

Нейтрофильді  гранулоциттердің апоптозы

 

Романовский-Гимзе  бояу әдісі

 

- Ортасындағы  клетка көлемі кішірейген

- Цитоплазмасы  нығыздалған

- Хроматині  конденсацияға ұшыраған

- Ядросы  фрагментацияланған

 

Флуоресцентті-микроскоптар аоқылы зерттеулер

 

• флуорохром
• Апоптоздың флуоресцентті анализі

(аннексин V-пен байланысы арқылы)

 

Имунногистохимиялық әдіс

 

• БКӨ-не қатысатын белок маркерлерді анықтау

Горяев-Том камерасында  санау

 

 

 

 

 

 

 

 

Витальды  бояуларды   қосып  апоптоздық денешіктерді санау

 

 

•       - микроскоп ұлғайтуы
•       - камераның сол жақ бөлігі
•         - оң жақ бөлігі
•        - клеткалар саны
•        -Горяев камерасының мөлшері (0,05 мм)

Трофобластық  клетканың апоптозға ұшырау кезеңдері

 

- 1/3 бөлігін жоғалтады;

- Апоптозға ұшыраған  клет көрші клеткалардан алыстай  бастайды;

- Хроматин  таға тәрізді формаға ие болады;

- Каспазалар  әсерінен протеолиз. Ол құрылымдық  белоктарды гидролизге ұшыртады

НАЗАРЛАРЫҢЫЗҒА  РАХМЕТ!

 

1