Возбудитель некробактериоза

Министерство  сельского хозяйства Российской Федерации

Забайкальский аграрный институт – филиал ФГОУ ВПО

«Иркутская  сельскохозяйственная академия» 

Технологический факультет

Кафедра микробиологии и иммунологии 
 

Реферат

                   Дисциплина:  Ветеринарная микробиология и иммунология

                               Тема: « Возбудитель некробактериоза» 
 
 
 

                                                                               Специальность: Ветеринария

      Курс: 3

    Выполнила: Зинченко Ирина

      Руководитель: 

                                               Чита 2011

Оглавление

       Введение3

       1.Морфологические и культуральные свойства……………………………3

       2. Патогенность и патогенез.………………………………………………..4

       3. Лабораторная диагностика..6

       4. Иммунитет и средства специфической профилактики…………………8

    Литература……………………………………………………………………9 
 
 
 
 
 
 
 
 

                                                       
 
 
 
 
 
 
 
 

                                                    Введение 
      Некробактериоз (лат. — Necrobacteriosis; Necrobacillosis; некробациллез) - инфекционная болезнь животных многих видов и человека, характеризующаяся гнойно-некротическим поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов и конечностей  
      Болезнь под различными названиями известна с середины XIX в. сначала у овец и позднее у животных других видов. Возбудителя впервые выделил Р. Кох (1881) и подробно описал Ф. Леффлер (1884).  
Болезнь распространена повсеместно, на всех континентах. В России у крупного рогатого скота болезнь в копытной форме приняла широкое распространение с 1970-х годов в процессе повсеместной голштинизации и закупки племенного скота, у северных оленей существовала давно.  
 
         1. Морфологические и культуральные свойства            

      Возбудитель некробактериоза — Fusobacterum necrophorum — строгий анаэроб. Это неспорообразующий грамотрицательный очень полиморфный микроорганизм. Типичное расположение в пораженных тканях — в виде нитей, иногда достигающих в длину 100...300 мкм. Толщина бактерий 0,7... 1 мкм. Наряду с нитями можно обнаружить отдельные палочки длиной 3...4 мкм и даже короткие формы в виде кокков. Неравномерно прокрашенные бактерии имеют вид четок, часто местами вздутые, с утолщениями. Различают четыре серотипа: А, АВ, В, С, из которых наиболее патогенные А и АВ. 

Культуральные свойства:

   Бактерия  некроза - строгий анаэроб. Для его  культивирования используют среду  Китт - Тароцци, бульон Мартена, печеночный бульон Хоттингера, сывороточный и глюкозо-кровяной агар, полужидкий агар, мозговую среду. Добавление к среде Китт - Тароцци 10-20 % свежей бычьей сыворотки и 0,2-0,5 % глюкозы приводит к более интенсивному росту микроба и повышению газообразования. Температурный оптимум 36-38 °С, рН среды 7,4-7,6.

   На  среде Китт - Тароцци через 24-48 ч появляется помутнение и на кусочках печени образуется хлопьевидный осадок; газообразование слабое, но у отдельных штаммов оно выражено хорошо. Через 5-8 суток наступает просветление среды и выпадение крошковатого осадка, разбивающегося при встряхивании в равномерную муть. При посеве в высокий столбик сывороточного агара через 4-5 дней образуются чечевицеобразные, мелкозернистые, с радиальными отростками колонии.

   На  поверхности глюкозо-кровяного агара  растет при создании вакуума до 4-10 мм ртутного столба, на 2-3-и сутки появляются мелкие круглые или продолговатые росинчатые колонии, увеличивающиеся в размерах к 4-5-му дню. Иногда колонии окружены слабой зоной зеленоватого гемолиза. Поверхность колоний гладкая, матовая. При помещении культуры в аэробные условия колонии продолжают расти, но становятся непрозрачными и шероховатыми.

   Микроб  хорошо растет на мозговой среде и  при добавлении 0,05 % сернокислого железа вызывает ее почернение за счет образования  сероводорода.

         2. Патогенность и патогенез

      В естественных условиях некробактериозом заболевают лошади, крупный рогатый  скот, буйволы, олени, овцы, козы, свиньи, собаки, кошки, куры, гуси, а также  дикие животные - косули, сибирские  козероги, лоси, архары, антилопы, ламы, зебры, бегемоты, бобры, сурки, ондатры, суслики, песчанки, пресмыкающиеся. К  некробактериозу восприимчив человек. Из лабораторных животных чувствительны  кролики и белые мыши.

   У лошадей некробактериоз протекает  в форме гангренозного мокреца. У взрослого крупного рогатого скота  поражаются нижние части конечностей, кожа вымени, слизистая оболочка влагалища  и матки; у телят наблюдается  дифтеритическое воспаление слизистых  оболочек ротовой полости, гортани  и внутренних органов. Для северных оленей характерен некробактериоз копыт (копытная болезнь). Взрослые свиньи болеют редко, но восприимчивы поросята-сосуны; у них отмечают некротический стоматит, ринит, дерматит и энтерит. У овец наиболее часто повреждаются конечности. У собак развивается флегмонозный и пустулезный дерматит с подкожными абсцессами. У кур поражаются глотка, корень языка, гортань, пищевод, внутренние органы.

   Бактерии  некроза продуцируют экзотоксин, эндотоксин и гемотоксин. Экзотоксин вырабатывается при культивировании  микроба в жидких питательных  средах, максимальная концентрация его  достигает в 24-36-часовых культурах. Более интенсивно его синтезируют  штаммы, выделенные от лошадей. Этот токсин нестоек и разрушается при 55 °С в течение 10 мин, при 100 °С - через 5 мин. Добавление к экзотоксину 0,3 % формалина  переводит его в анатоксин. Эндотоксин образуется при распаде микробных  клеток, обладает сильным некротизирующим  действием.

   Гемотоксин  интенсивно продуцируется на средах из свежего мяса с добавлением  пептона, 0,5 % глюкозы, фосфата натрия и небольшого количества крови; обладает термолабильными свойствами и разрушается  при  48 °С через 15 мин, при 56 °С полностью  инактивируется, при 4 °С сохраняется 2 месяца. Лизирует эритроциты лошади, крупного рогатого скота, барана, свиньи, морской  свинки, кролика и голубя.

Патогенез:

   Некробактериоз  – послераневая инфекция. Бактерия некроза интенсивно размножается в  травмированных тканях: они недостаточно снабжаются кислородом вследствие нарушения  целостности капилляров. Это приводит к созданию анаэробных условий. В  здоровых тканях, нормально насыщенных кислородом, возбудитель не размножается. Особенно благоприятные условия  для своего развития бактерии находят  в крови гематом. 

   В организме бактерия некроза синтезирует  токсические компоненты, блокирующие  внутриклеточные ферментные системы  и вызывающие некроз окружающих тканей. Процесс осложняется механической закупоркой капилляров интенсивно размножившимися  микробными клетками.

   Из  очага поражения микроб гематогенным путем может распространяться по организму, в значительной степени  этому способствует поражение стенок кровеносных сосудов и отрыв  тромбов, инфицированных бактериями некроза. В результате процесс распространяется на соседние ткани, возникают вторичные  очаги в коже, сухожилиях, костях. Проникновение бактерий в кровь  приводит к развитию септицемии и  образованию метастатических некротических  очагов в легких, сердечной мышце, печени. Заболевание приобретает  злокачественное течение и нередко  заканчивается смертью.

         3. Лабораторная диагностика

   В бактериологическую лабораторию направляют кусочки пораженных органов и  тканей с прилегающей здоровой тканью, целые трупы мелких животных и  птиц. Содержимое из некротизированных  очагов можно набирать в пастеровские пипетки, запаивать и пересылать в лабораторию.

   Для прижизненного исследования берут  некротические поражения на границе  омертвевшей и здоровой ткани  после предварительной механической очистки от распавшейся ткани  и гноя. Одновременно из этих же участков готовят несколько препаратов-отпечатков на предметных стеклах. При поражении  ротовой полости, кроме некротических  наложений, материалом для биологического исследования может быть слюна больного животного. В лабораторию пробы  отправляются в свежем виде (с нарочным) или же в 30 % -ном стерильном глицерине. 
 

   Мазки, приготовленные из некротизированной  ткани, фиксируют спирт-эфиром 10 мин  и окрашивают синькой Леффлера (лучше  с подогреванием 3-4 мин), по Муромцеву, Романовскому-Гимзе, а также Граму. В мазках обнаруживают зернистоокрашенные нити или тонкие длинные грамотрицательные  палочки. Микроскопическое исследование дает основание поставить только предварительный диагноз.

   Бактериологическое  исследование. Для посевов используют кусочек некротизированной ткани, отобранной на границе со здоровой. Его помещают в среду Китт - Тароцци с 10 % свежей крови или сыворотки крупного рогатого скота и 0,5 % глюкозы, дополнительно можно засевать на полужидкий агар. Посевы инкубируют 2-3 суток при температуре 37 °С. Для определения сопутствующей аэробной микрофлоры дополнительно производят посевы на МПА и МПБ.

   При выделении культур на глюкозо-кровяном агаре кусочек некротизированной ткани растирают, суспендируют в физиологическом растворе и дробно засевают на поверхность агара. Сахарный агар высоким столбиком расплавляют, охлаждают до 45 °С и вносят материал. Культуры выращивают в анаэробных условиях, рост обычно появляется через 2-3 суток. Материал часто бывает загрязнен сопутствующей микрофлорой, поэтому для выделения чистой культуры бактерии некроза необходимо предварительно заразить лабораторное животное.

   Биологическое исследование. Для выделения из патологического материала чистой культуры бактерии некроза наиболее пригодны кролики, можно использовать и белых мышей. Кролика заражают под кожу уха в дозе 0,5-1 мл материала или бульонной культуры. Через 2-4 дня на месте введения развивается некротический очаг, распространяющийся на все ухо и мягкие ткани головы. Материал из пораженного очага используют для приготовления мазков и посевов. На 6-l0-й день кролик обычно погибает. При вскрытии обнаруживаются некротические очаги в мышцах головы, брюшной стенки, сердце, печени и других паренхиматозных органах. В результате внутривенного заражения животное погибает на 3-5-е сутки. Наблюдают за подопытным кроликом 10 дней.

   Белых мышей заражают 0,3-0,5 мл бульонной  культуры подкожно в области корня  хвоста. На 8-й день в окружности инъекции развивается припухлость и нагноение, на 5-6-й день - некроз, на 8-10-й день хвост отпадает. Мыши погибают на 10-14-й  день с явлениями некроза мышц в области заражения, гнойными очагами  в печени, легких, сердце.

   Для серологического диагноза некробактериоза  в 1945 г. Я. Е. Коляков и И. В. Захаров предложили РСК. В качестве антигена использовали экстракт из бактериальной массы 3-недельных культур бактерии некроза на печеночном бульоне с титром до 1: 40. По предварительным наблюдениям, положительные показания реакции совпадали с клиникой некробактериоза у 95 % животных. С этой целью испытывалась также реакция агглютинации. Однако ни РСК, ни другие серологические реакции не получили практического применения в качестве тестов иммунологического диагноза некробактериоза.

         4. Иммунитет и специфическая профилактика

      Естественный  иммунитет при переболевании  некробактериозом практически не вырабатывается. Для вынужденной иммунизации  применяют инактивированные вакцины, зарегистрированные и разрешенные  к применению (поливалентную вакцину  против некробактериоза животных, ассоциированную  вакцину против некробактериоза  конечностей крупного рогатого скота  «Нековак», эмульгированную вакцину  ВИЭВ).  
 
 

                                                    Литература 
1. Емельяненко П.А., Дунаев Г.В. Кудлай Д.Г. и др. «Ветеринарная микробиология» М.: Колос, 1982.

2. Костенко  Т.С., Родионова В.Б., Скородумов Д.И.  «Практикум по ветеринарной микробиологии  и иммунологии» М.: Колос, 2001.

3.  Радчук  Н.А., Дунаев Г.В., Колычев Н.М. и  др. Учебник «Ветеринарная микробиология  и иммунология» М.: Агропромиздат, 1991.